目錄:上海華雅思創(chuàng)生物科技有限公司>>試劑盒>>ELISA試劑盒>> F140Cygnus HCP 畢赤酵母菌ELISA試劑盒
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產(chǎn)品名稱:Cygnus HCP 畢赤酵母菌ELISA試劑盒
產(chǎn)品貨號:F140
產(chǎn)品規(guī)格: 96T/盒
產(chǎn)品品牌:Cygnus
產(chǎn)品簡介:
Pichia pastoris畢赤酵母基因表達系統(tǒng)經(jīng)過十多年發(fā)展,成為較完善的外源基因酵母表達系統(tǒng),具有易于高密度酵母發(fā)酵,欲表達基因可以穩(wěn)定整合在宿主酵母基 因組中,能使產(chǎn)物有效分泌并適當糖基化,培養(yǎng)方便經(jīng)濟等特點。Pichia pastoris畢赤酵母基因表達系統(tǒng)利用強效可調(diào)控啟動子AOX1,已高效表達了HBsAg、TNF、EGF、破傷風(fēng)毒素C片段、基因工程抗體等多種外 源基因,證實Pichia pastoris畢赤酵母表達系統(tǒng)為高效、實用、簡便 ,以提高表達量并保持產(chǎn)物生物學(xué)活性為突出特征的外源基因表達系統(tǒng),而且非常適宜擴大為工業(yè)規(guī)模Pichia pastoris畢赤酵母發(fā)酵。
產(chǎn)品用途:
用于檢測在畢赤酵母表達系統(tǒng)中重組表達的產(chǎn)物宿主細胞蛋白污染。*檢測濃度<0.3ng/mL。
產(chǎn)品組份:
● Anti- Pichia pastoris:HRP(辣根過氧化物酶標記) 1x12mL F141(Product#)
● Anti- Pichia pastoris coated微量滴定板 12x8孔 F142
● Pichia pastoris HCP標準液(0, 1, 4, 20, 75, 250ng/mL) 1mL/瓶 F143
● Stop Solution終止液(0.5M硫磺酸) 1x12mL F006
● TMB (3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯氨) 1x12mL F005
● Wash Concentrate清洗物(20倍濃縮) 1x50mL F004
檢測原理:
Pichia pastoris HCPs檢測是一個雙位點酶聯(lián)免疫檢測。樣本中包含的Pichia pastoris HCPs蛋白與標記有抗- Pichia pastoris抗體的辣根過氧化物酶同時反應(yīng),反應(yīng)發(fā)生在之前涂有一層吸附性抗- Pichia pastoris蛋白抗體的微量滴定板中進行。免疫反構(gòu)成為夾層式結(jié)構(gòu):固相抗休-HCP-酶標記抗體。反應(yīng)結(jié)束后清洗微量滴定板去除未結(jié)合反應(yīng)物。添加 TMB作用底物反應(yīng)。微量滴定板讀數(shù)器上測定水解物濃度,水解物濃度與Pichia pastoris HCPs蛋白濃度成比例。用提供的標準液繪制標準曲線,根據(jù)讀數(shù)可以計算出Pichia pastoris HCPs蛋白含量。
檢測過程:
標準檢測:取出所有試劑平衡到室溫→分別移取25μl標準液,對照物和樣品至待測孔→移取100μl anti- Pichia pastoris:HRP(#F141)至每孔→密封滴定板,搖床室溫溫育3小時(快速檢測時溫育1小時),180rpm→清空小孔,用紙吸干殘留液,350μl清洗緩沖液清洗4次→加100μl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘,不需搖床→加100μl反應(yīng)終止液(#F006)→分光光度計450/650nm讀數(shù)
結(jié)果分析:
標準液(0, 1, 4, 20, 75, 250ng/mL)可用于制作標準曲線,標準液濃度相當于免疫反應(yīng)HCP總濃度。根據(jù)測定的小孔中標準液吸光值繪制標準曲線。數(shù)據(jù)分析可以使用計算機選配曲線,例如點到點,三次樣本函數(shù),或四參數(shù)邏輯曲線。不要使用線性回歸分析修改樣品吸光值,這樣會出現(xiàn)顯著誤差。也可以手工繪圖,Y軸標注吸光值,X軸標注濃度。然后根據(jù)樣品吸光值計算出樣品中HCP濃度。(操作時每一濃度標準液都要重復(fù)滴定到兩個小孔中,以便計算平均分光光度值,樣品也需計算平均吸光值)。
產(chǎn)品名稱:Cygnus HCP 畢赤酵母菌ELISA試劑盒
產(chǎn)品貨號:F140
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關(guān)于公司:
Cygnus technologies, Inc.是美國一家專門從事生物工程和制藥過程中殘留物檢測的一系列產(chǎn)品。生物制品生產(chǎn)過程中存在許多影響產(chǎn)品質(zhì)量的殘留物,諸如特殊重組表達系統(tǒng)中宿主細胞蛋白( Host Cell protein, HCP )的殘留以及生物制品加工過程中培養(yǎng)物殘留的污染物。公司提供了廣泛而靈敏度*的一系列用于檢測生物工程殘留物的產(chǎn)品。共有39種Elisa 檢測試劑盒,包括原核、真核表達細胞宿主蛋白檢測試劑盒,細胞培養(yǎng)殘留物檢測試劑盒等
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