產(chǎn)品名稱：Beyotime 活性氧檢測試劑盒

產(chǎn)品貨號： S0033S

英文名稱：Reactive Oxygen Species Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：>100次

產(chǎn)品介紹：

活性氧檢測試劑盒(Reactive Oxygen Species Assay Kit，也稱ROS Assay Kit)是一種利用熒光探針DCFH-DA進行活性氧檢測的試劑盒。DCFH-DA本身沒有熒光，可以自由穿過細胞膜，進入細胞內(nèi)后，可以被細胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細胞膜，從而使探針很容易被裝載到細胞內(nèi)。細胞內(nèi)的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF。檢測DCF的熒光就可以知道細胞內(nèi)活性氧的水平。

本試劑盒提供了活性氧陽性對照試劑Rosup，以便于活性氧的檢測。Rosup是一種混合物(compound mixture),濃度為50mg/ml。

本試劑盒本底低，靈敏度高，線性范圍寬，使用方便。

本試劑盒S0033S包裝可以測定100-500個樣品，S0033M包裝可以測定500-2500個樣品。

產(chǎn)品使用說明：

1. 裝載探針

對于刺激時間較短(通常為2小時以內(nèi))的細胞，先裝載探針，后用活性氧陽性對照或自己感興趣的藥物刺激細胞。對于細胞刺激時間較長(通常為6小時以上)的細胞，先用活性氧陽性對照或自己感興趣的藥物刺激細胞，后裝載探針。

原位裝載探針：本方法僅適用于貼壁培養(yǎng)細胞。按照1:1000用無血清培養(yǎng)液稀釋DCFH-DA，使終濃度為10微摩爾/升。去除細胞培養(yǎng)液，加入適當體積稀釋好的DCFH-DA。加入的體積以能充分蓋住細胞為宜，通常對于六孔板的一個孔加入稀釋好的DCFH-DA不少于1毫升。37℃細胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育20分鐘。用無血清細胞培養(yǎng)液洗滌細胞三次，以充分去除未進入細胞內(nèi)的DCFH-DA。通常活性氧陽性對照在刺激細胞20-30分鐘后可以顯著提高活性氧水平。

收集細胞后裝載探針：按照1:1000用無血清培養(yǎng)液稀釋DCFH-DA，使終濃度為10微摩爾/升。細胞收集后懸浮于稀釋好的DCFH-DA中，細胞濃度為一百萬至二千萬/毫升，37℃細胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育20分鐘。每隔3-5分鐘顛倒混勻一下，使探針和細胞充分接觸。用無血清細胞培養(yǎng)液洗滌細胞三次，以充分去除未進入細胞內(nèi)的DCFH-DA。直接用活性氧陽性對照或自己感興趣的藥物刺激細胞，或把細胞等分成若干份后刺激細胞。通?；钚匝蹶栃詫φ赵诖碳ぜ毎?0-30分鐘后可以顯著提高活性氧水平。

說明：僅在陽性對照孔中加入Rosup作為陽性對照，其余孔不必加入Rosup。

2. 檢測

對于原位裝載探針的樣品可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察，或收集細胞后用熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測。對于收集細胞后裝載探針的樣品可以用熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測，用激光共聚焦顯微鏡直接觀察也可以。

3. 參數(shù)設(shè)置

使用488nm激發(fā)波長，525nm發(fā)射波長，實時或逐時間點檢測刺激前后熒光的強弱。DCF的熒光光譜和FITC非常相似，可以用FITC的參數(shù)設(shè)置檢測DCF。

產(chǎn)品組分：

S0033S-1DCFH-DA(10mM)0.1ml

S0033S-2活性氧陽性對照(Rosup, 50mg/ml)1ml

說明書1份

儲存與運輸：

-20℃保存，一年有效。

產(chǎn)品訂購信息：

品牌             貨號                   名稱                                       規(guī)格

Beyotime  P0131-5ml   抗熒光淬滅封片液(含DAPI)5ml   5ml

Beyotime  P0131-25ml   抗熒光淬滅封片液(含DAPI)25ml 25ml

產(chǎn)品名稱：Beyotime 活性氧檢測試劑盒

產(chǎn)品貨號： S0033S

關(guān)于公司：

Beyotime創(chuàng)辦于2001年。近20年來專注于自主研發(fā)和生產(chǎn)。2007年成立上海碧云天生物技術(shù)有限公司，為                    特新“小巨人"企業(yè)，并進一步入選第二批第一年建議支持的專精特新“小巨人"企業(yè)， 也是G60科創(chuàng)走廊一類重點扶持企業(yè)和上海市專精特新中小企業(yè)。江蘇碧云天為江蘇省優(yōu)良企業(yè)，南通市雙創(chuàng)優(yōu)企。公司主要研發(fā)生產(chǎn)生物、醫(yī)學(xué)研究用試劑、試劑盒、消耗品和儀器設(shè)備。

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