　　膠原酶是從溶組織梭狀細(xì)胞芽孢桿菌提取制備的，主要水解結(jié)締組織中膠原蛋白成分。當(dāng)擬消化的組織較硬，內(nèi)含較多結(jié)締組織或膠原成分時(shí)，用胰蛋白酶解離細(xì)胞的效果較差，這時(shí)可采用膠原酶解離細(xì)胞法。膠原酶僅對(duì)細(xì)胞間質(zhì)有消化作用而對(duì)上皮細(xì)胞影響不大。因此適于消化分離纖維性組織、上皮及癌組織，可使上皮細(xì)胞與膠原成分分離而不受損害。常用劑量為*終濃度200U/ml（約為1mg/mL）或0.03%~0.3%。膠原酶分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝細(xì)胞膠原酶，要根據(jù)所要分離消化的組織類型選擇膠原酶類型。

　　關(guān)于膠原酶的配制和保存：

　　1.配制的緩沖液：膠原酶應(yīng)該用氏液來(lái)配。不能用三蒸水因?yàn)闈B透壓太低細(xì)胞不能耐受，也不能用培養(yǎng)液因?yàn)槠渲械某煞謴?fù)雜對(duì)消化有影響，*也不用氏液因?yàn)镃a2+Mg2+離子易與一些成分結(jié)合形成沉淀影響分離（但這是理論上，我曾經(jīng)試過(guò)結(jié)果也還不錯(cuò)），PBS文獻(xiàn)上沒(méi)見(jiàn)過(guò)，但應(yīng)該理論上可以用的

　　2.配制的方法：

　　書(shū)上是36.5攝氏度攪拌溶解2h；4攝氏度過(guò)夜；0.22um過(guò)濾除菌；

　　但網(wǎng)上有人的方法是：室溫下直接溶，好溶，溶完直接0.22um過(guò)濾除菌，據(jù)說(shuō)也可行；

　　3.配制的濃度：1mg/ml、0.1-0.5%、0.025%（不同組織采用不同濃度）

　　4.配置后保存方法：

　　有的人推薦現(xiàn)用現(xiàn)配；

　　4度存放，*1~2周內(nèi)用完；

　　長(zhǎng)時(shí)間貯存宜在-20攝氏度，用前可放37度溶解，但溶解時(shí)間不能過(guò)久，防止酶活性受影響；

　　5.消化組織時(shí)間：取決于消化液濃度和組織類型，一般消化時(shí)間為2－3小時(shí)或者4度過(guò)夜

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