高通量組織研磨儀對多酚含量高的植物（木本植物）的細胞破壁

 

實驗目的

       研磨破碎多酚含量高的植物（木本植物），后續(xù)可提取其核酸或蛋白。

 

實驗原理

       充分磨碎研磨破碎多酚含量高的植物，再用相關(guān)試劑提取其總RNA。

 

實驗材料和器具

樣品：銀杏葉子

儀器：高通量組織研磨儀（上海凈信，Tissuelyser-24）

耗材：離心管（上海凈信，0.4研磨單位），研磨珠（上海凈信，5號，1顆）

 

實驗步驟

1.取0.2研磨單位的樣品放入0.4體積epp管中

2.加入1-2粒5號研磨珠

3.加入0.2體積l的CTAB 抽提液

4.將加有樣品的epp管放入上海凈信的高通量組織研磨儀的適配器中，蓋好

5.將研磨頻率調(diào)到12單位振頻，設(shè)定研磨時間為90秒（可根椐樣品的研磨的難易程度來調(diào)節(jié)，此數(shù)據(jù)是以銀杏葉子為樣本得出）

6.啟動研磨儀對樣品進行研磨（根據(jù)不同的樣品，本身性質(zhì)不同，需要對研磨頻率和研磨時間進行適當?shù)恼{(diào)整）

 

實驗注意事項

       如果需要提取的樣品比較多（比如1g），研磨好的樣品在后續(xù)的提取中，需要轉(zhuǎn)移到大的epp管中，研磨時可以加入較少的抽提液，研磨完畢按照1g樣品2體積提取液補充抽提液，進行后續(xù)的操作。