高效液相色譜儀結(jié)構(gòu)剖析

1 、高壓泵

HPLC使用的色譜柱是很細(xì)的（1～6mm），所用固定相的粒度也非常?。◣爪蘭到幾十μm），所以流動(dòng)相在柱中流動(dòng)受到的阻力很大，在常壓下，流動(dòng)相流速十分緩慢，柱效低且費(fèi)時(shí)。為了達(dá)到快速、高效分離，必須給流動(dòng)相施加很大的壓力，以加快其在柱中的流動(dòng)速度。為此，須用高壓泵進(jìn)行高壓輸液。高壓、高速是高效液相色譜的特點(diǎn)之一。

2 、梯度洗提

類似于GC中的程序升溫。已成為現(xiàn)代高效液相色譜中不能少的部分。

梯度洗提，就是載液中含有兩種（或更多）不同極性的溶劑，在分離過程中按一定的程序連續(xù)改變載液中溶劑的配比和極性，通過載液中極性的變化來改變被分離組分的分離因素，以提高分離效果。

3 、進(jìn)樣裝置

（1）注射器進(jìn)樣裝置：進(jìn)樣所用微量注射器及進(jìn)樣方式與GC法一樣。進(jìn)樣壓力<150×105Pa，當(dāng)進(jìn)樣壓力>150×105Pa時(shí)，必須采用停流進(jìn)樣。

（2）高壓定量進(jìn)樣閥：與GC法用的流通法相似，能在高壓下進(jìn)樣。

4、色譜柱

色譜柱是色譜儀最重要的部件（心臟）。通常用后壁玻璃管或內(nèi)壁拋光的不銹鋼管制作的，對(duì)于一些有腐蝕性的樣品且要求耐高壓時(shí)，可用銅管、鋁管或聚四氟乙烯管。

柱子內(nèi)徑一般為1～6mm。常用的標(biāo)準(zhǔn)柱型是內(nèi)徑為4.6或3.9mm ，長(zhǎng)度為15～30cm的直形不銹鋼柱。填料顆粒度5～10μm ，柱效以理論塔板數(shù)計(jì)大約7000～10000 。

發(fā)展趨勢(shì)是減小填料粒度和柱徑以提高柱效。

5、檢測(cè)器

主要包括紫外光度檢測(cè)器、光電二極管陣列檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、差示折光檢測(cè)器和電導(dǎo)檢測(cè)器。