 |
南京科佰生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： atcc代理,ATCC細胞系,ATCC細胞株,ATCC細胞庫購買 |
11
聯(lián)系電話
|
南京科佰生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： atcc代理,ATCC細胞系,ATCC細胞株,ATCC細胞庫購買 |
聯(lián)系電話
| 參考價 | 面議 |
更新時間：2024-10-09 15:28:21瀏覽次數(shù)：625
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝!
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | T-25 Flask |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CBP73200 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 僅限科研使用 |
EML4-ALK V1 G1202R/BaF3 EML4-ALK V1 G1202R/BaF3
| I. Background | |
棘皮微管相關(guān)蛋白（Echinoderm microtubule-associated protein，EMAP）在海膽中表達， 是第一個被鑒定的 EMAP 樣蛋白(EML)家族成員。它是海膽卵微管（MT）制劑的主要成分， 也被發(fā)現(xiàn)在間期和有絲分裂時與微管蛋白共定位。 ALK 是胰島素受體超家族的一員，在間變性大細胞淋巴瘤中通過與核磷蛋白 （NPM）融合發(fā)現(xiàn)。癌細胞中的 ALK 信號傳導(dǎo)通過三種主要機制發(fā)生：基因融合、基因 擴增和點突變。 在肺癌中檢測到的第一個致癌融合是 EML4-ALK，由 2 號染色體短臂上的一個小倒位 產(chǎn)生，促進 EML4 N 末端與 ALK（外顯子 20）的融合。一旦 EML4 中的斷點出現(xiàn)在不同 的外顯子（2、6、13、14、15、18 和 20）中，EML4-ALK 融合蛋白就會呈現(xiàn)多種變體。 其中 EML4-ALK 融合中最常見的變體亞型為 V1 和 V3a/b，約占所有 EML4-ALK 融合突變 的 70%。不同 EML4-ALK 變體的表達可能會影響對 ALK TKI 的反應(yīng)，從而影響繼發(fā)性耐 藥特異性 ALK 突變的發(fā)展傾向。EML4 與 ALK 激酶結(jié)構(gòu)域的融合導(dǎo)致異常信號傳導(dǎo)，從 而增加細胞生長、增殖和細胞存活。在 NSCLC 患者的 ALK 中檢測到的點突變約占觀察到 的耐藥機制的三分之一，其中最常見的是 p.L1196M（類似于 EGFR 的 p.T790M）。其他確 定的突變有 p.1151Tins、p.L1152R、p.C1156Y、p.I1171T、p.F1174L、p.V1180L、p.G1202R、 p.D1203N、p.S1206Y 和 p.G1269A 。這些突變增加了激酶受體與 ATP 的親和力，降 低了 TKI 的結(jié)合親和力。ALK 基因突變，例如 p.1151Tins 和 p.G1202R，導(dǎo)致對第二代 ALK TKI 產(chǎn)生耐藥性；p.L1196M 和 p.L1152R 賦予對第二代和第三代 ALK TKI 的敏感性； p.G1202R 導(dǎo)致對第一代和第二代 ALK TKI 產(chǎn)生耐藥性。 | |
| II. Description | |
BaF3（小鼠原 B 細胞）的生長和增殖需要 IL-3 的維持。通過引入各種表達激酶的基因， 能作為 BaF3 的驅(qū)動基因，讓 BaF3 不再依賴 IL-3 而增殖，進而激酶基因成為 BaF3 增殖依 賴的驅(qū)動基因，用于評估小分子藥物對激酶的靶向抑制作用，原理及流程見下圖所示。  Figure 1. EML4-ALK V1 [G1202R] BaF3 細胞的構(gòu)建原理圖 | |
| III. Introduction | |
| Cell Line Name： | EML4-ALK V1 [G1202R]/BaF3 |
| Host Cell: | Ba/F3 |
| Stability: | 16 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Application: | Anti-proliferation assay and PD assay |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Complete Culture Medium: | RPMI-1640+10%FBS |
| Mycoplasma Status: | Negative |
| IV. Representative Data | |
1.WB of EML4-ALK V1 G1202R/BaF3
Figure 2. Protein Expression of ALK detected by antibody | |
2. Sanger Sequencing of EML4-ALK v1 Fusion
Figure 3. Sanger sequencing of EML4-ALK v1 Fusion
Figure 4. Sanger sequencing of ALK v1 G1202R (c.3604G>A) | |
3. Anti-proliferation assay
Figure 5. CCK8 Proliferation Assay of EML4-ALK v1 [G1202R] BaF3(C5). | |
