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更新時間：2024-11-11 10:31:09瀏覽次數：210
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NTSR1/β-Arrestin/CHO NTSR1/β-Arrestin/CHO NTSR1/β-Arrestin/CHO
| I. Background | |
| 神經緊張素（NTS）是中樞神經系統(tǒng)中的一種神經遞質/調節(jié)劑，也是外周的一種激素。 它由腸粘膜中的內分泌細胞釋放，經肝臟代謝，并參與胃腸道的多種功能。NTS 能夠抑制 胃酸分泌和調節(jié)腸道運動，NTS 還在消化道癌癥等多種癌癥中發(fā)揮致癌作用。 神經緊張素（NTS）通過與兩種受體結合：NTSR1 和 2 （GPCR）和 NTSR3/sortilin。 神經緊張素受體 1 （NTSR1）是一種由內源性肽配體調控的 A 類 GPCR，NTS 激活后， NTSR1 偶聯(lián)各種信號效應器，包括 G 蛋白的幾種亞型、GRKs 和β-Arrestins，介導中樞神 經系統(tǒng)的神經傳遞和神經調節(jié)。NTSR1 已被認為是成癮、肥胖、鎮(zhèn)痛、癌癥、帕金森病和 精神分裂癥的藥物靶點。SBI-553 是 NTSR1 的β-Arrestin 偏向變構配體，可拮抗 G 蛋白信 號，選擇性地減少成癮行為，而不會產生低血壓、低體溫和運動障礙等不良副作用，這些 副作用通常與 NTS 誘導的 NTSR1 的平衡激動作用有關。此外，NTS 與 NTSR1 的 Gαq11 亞基結合觸發(fā) PLC-γ的激活，從而導致 IP3 和 DAG 的產生， 觸發(fā)細胞內 Ca 2+的動員和 PKC 的激活，導致 NFκB 轉錄因子的激活。NTS 也可以誘導 Rho GTPases、FAK 和原癌基 因蛋白激酶 Src 的激活，從而調節(jié)細胞骨架動力學和細胞遷移。 | |
| II. Description | |
NTSR1 β-Arrestin CHO 報告基因藥靶模型很好的模擬了體內 NTSR1/β-Arrestin 的信號 轉導過程，原理見下圖所示。當缺乏配體刺激時，β-Arrestin 不與 NTSR1 結合，融合β- Arrestin 的熒光素酶處于失活構象，當 NTSR1 遭遇配體刺激時，融合熒光素酶報告基因的 β-Arrestin 被招募，使熒光素酶報告基因處于激活狀態(tài)，加入其底物后發(fā)光信號增強。  Figure 1. NTSR1 β-Arrestin CHO 細胞模型原理圖 | |
| III. Introduction | |
| Host Cell: | CHO |
| Stability: | 20 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Culture Medium: | F12K+10%FBS+5 μg/ml puromycin+5 μg/ml blastcidin |
| Mycoplasma Status: | Negative |
| Storage: | Liquid nitrogen immediately upon delivery |
| Application(s): | Functional assay for NSTR1 |
| Transducer: | β-arrestin recruitment |
| IV. Description of Host Cell Line | |
| Organism: | Hamster |
| Tissue: | Ovary |
| Morphology: | Epithelial |
| Growth Properties: | Adherent |
| Ⅳ. Representative Data | |
Figure 2. Recombinant NTSR1/β-Arrestin/CHO stably expressing NTSR1. | |
Figure 3. Dose response of Neurotensin in NTSR1 β-Arrestin CHO (C3). | |
