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光反應(yīng)性活性氧（ROS）測定試驗(yàn)設(shè)備
點(diǎn)擊次數(shù)：815 發(fā)布時(shí)間：2024-8-7
藥品監(jiān)督管理局組織起草了《化妝品毒理學(xué)試驗(yàn)方法樣品前處理通則》等19項(xiàng)制修訂項(xiàng)目并形成相應(yīng)檢驗(yàn)方法，經(jīng)化妝品標(biāo)準(zhǔn)專家委員會(huì)全體會(huì)議審議通過，于2024年3月21日予以發(fā)布。其中《化妝品毒理學(xué)試驗(yàn)方法樣品前處理通則》的 <光反應(yīng)性活性氧（ROS）測定試驗(yàn)方法>為新增檢驗(yàn)方法，納入《化妝品安全技術(shù)規(guī)范（2015年版）》，自2024年12月1日起實(shí)施。
光反應(yīng)性活性氧（ROS）測定試驗(yàn)方法
ROS測定的試驗(yàn)原理：
一些具有光反應(yīng)性的化學(xué)物質(zhì)暴露于紫外線時(shí)，吸收某一波長光子，誘導(dǎo)發(fā)色團(tuán)激發(fā)，激發(fā)能量轉(zhuǎn)移到氧分子上，發(fā)生光化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生活性氧（包括單線態(tài)氧SO和超氧陰離子SA），活性氧是光毒性反應(yīng)中的重要中間物質(zhì)。單線態(tài)氧和咪唑反應(yīng)生成的過氧化物中間體對N,N-二甲基-4-亞硝基苯胺（RNO）具有漂白作用，使其在440 nm下的吸光度降低。超氧陰離子與氯化硝基四氮唑藍(lán)（NBT）反應(yīng)生成NBT+，其在560 nm波長下具有光吸收。 本試驗(yàn)方法通過分光光度法測定化學(xué)物質(zhì)經(jīng)紫外線照射后對RNO在440 nm下吸光度的減少及對NBT+在560 nm下吸光度的增加來判斷該化學(xué)物質(zhì)是否具有光反應(yīng)性。
光反應(yīng)性活性氧測定試驗(yàn)方法對太陽光模擬器的要求：
1.選擇合適的光源用于提供紫外線和可見光的照射，通過濾光片減少波長小于290 nm的UVC，使光源盡量接近室外日光。推薦的測試條件如下：
a) 配備濾光片的太陽模擬器（減少紫外線波長<290 nm）
— 輻照度：1.8 mW/cm2至2.2 mW/cm2，照射1小時(shí)（例如，LUYOR-3450的指標(biāo)設(shè)置值為2.1mW/cm2），
— UVA光照劑量：6.5 J/cm2至7.9 J/cm2。
b) 配備濾光片的太陽模擬器（減少紫外線波長<300 nm）
— 輻照度：3.0 mW/cm2至5.0 mW/cm2，照射1小時(shí)。
— UVA光照劑量：11 J/cm2至18 J/cm2（見附錄B）。
2.測試條件根據(jù)實(shí)際選擇合適具體條件。
3.ROS的產(chǎn)生受溫度影響，太陽光模擬器應(yīng)配備溫度控制裝置，光照期間溫度在20℃~29℃。
利用LUYOR-3450進(jìn)行光反應(yīng)性活性氧（ROS）測定的優(yōu)勢：
1.和傳統(tǒng)的高壓汞燈的太陽光模擬器相比,LUYOR-3450采用的是低壓汞燈光源，沒有高熱量產(chǎn)生。
2.采用自濾色紫外線燈管，沒有290nm以下的紫外線輸出。
3.內(nèi)置高精度紫外線傳感器，能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測紫外線強(qiáng)度。
4.微處理器控制紫外輻照能量，達(dá)到預(yù)設(shè)的輻照劑量自動(dòng)停止運(yùn)行。
5.雙風(fēng)扇冷卻，確保輻照腔保持室溫狀態(tài)。