目錄:北京索萊寶科技有限公司>>基因工程>>PCR>> PC1300Solarbio Pfu DNA Polymerase
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更新時(shí)間:2024-08-20 10:23:50瀏覽次數(shù):1305評(píng)價(jià)
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本公司生產(chǎn)的Pfu DNA Ploymerase是從克隆有Pyrococcus furiosis DNA Ploymerase基因的大腸桿菌中表達(dá)并經(jīng)過柱純化分離出來的重組蛋白,其分子量為90kDa。由于Pfu酶具有3’→5’核酸外切酶活性,它能糾正DNA擴(kuò)增過程中產(chǎn)生的錯(cuò)配,而傳統(tǒng)的Taq酶卻不能,其它耐熱DNA Polymerase如Vent、Deep Vent、Tli、UITma等雖具有校正功能,但Pfu酶是目前已發(fā)現(xiàn)的所有耐DNA Polymerase中出錯(cuò)率低的。Pfu酶無5’→3’核酸外切酶活性,PCR反應(yīng)中的延伸速度一般為0.5-1kb/分鐘,比Taq酶要低。Pfu 酶比Taq酶熱穩(wěn)定性更好,95℃ 1小時(shí)仍保持90%以上的活性,對(duì)于GC含量很高D的模板,變性溫度可以提高到98℃而不影響其活性。Pfu酶的PCR產(chǎn)物為平末端,可加A處理再與T-載體連接或使用平末端克隆載體。一般用于DNA的高保真擴(kuò)增,如基因表達(dá)克隆、基因定點(diǎn)突變、細(xì)胞內(nèi)基因點(diǎn)突變分析(SNP)和末端補(bǔ)平等?;钚远x:1單位(U) Pfu DNA Polymerase活力定義為在74℃,30分鐘內(nèi),以活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物,將10nmol脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質(zhì)所需的酶量。質(zhì)量控制檢測(cè):SDS-PAGE檢測(cè)Pfu DNA Polymerase純度大于99%;經(jīng)檢測(cè)無外源核酸酶活性
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