Masson 三色染色試劑盒

Masson 三色染色是結(jié)締組織染色知更鳥經(jīng)典的一種方法，是顯示組織中纖維的主要方法之一，是膠原纖維染色而經(jīng)典的技術(shù)方法。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān)：分子的大小由分子量來(lái)體現(xiàn)，小分子量容易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織；而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)稀松的、滲透性高的組織。然而，淡綠或苯胺藍(lán)的分子量很大，因此Masson染色后肌纖維呈紅色，膠原纖維呈綠色或藍(lán)色，主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。

Masson試劑盒的特點(diǎn)：◆染色穩(wěn)定；◆分化時(shí)間短，1-2分鐘；◆色彩清楚鮮艷；◆使用范圍廣，適宜于組織的石蠟切片、冰凍切片等染色；◆所染切片保存時(shí)間長(zhǎng)且不易褪色。

產(chǎn)品組成：

試劑（A-1） 蘇木素染色液 25ml

試劑（A-2） 三氯化鐵水溶液 25ml

試劑（B） 鹽酸乙醇分化液 50ml

試劑（C） 氨水水溶液 50ml

試劑（D） 麗春紅酸性品紅染色液 50ml

試劑（E） 乙酸水溶液 50ml

試劑（F） 磷鉬酸水溶液 50ml

試劑（G） 苯胺藍(lán)染色液 50ml

注：臨用時(shí)取A1、A2等量混合，成為試劑A，不可預(yù)先配制后放置，因染色液的色素根與鐵會(huì)化合。形成不容性沉淀，等量混合后，一般24小時(shí)后失去人力。

主要成分：

試劑（A）:主要由蘇木素和三氯化鐵組成。

試劑（B）:主要由乙醇和鹽酸水溶液組成。

試劑（C）:主要由稀氨水水溶液組成。

試劑（D）:主要由麗春紅和酸性品紅組成。

試劑（E）:主要由乙酸水溶液組成。

試劑（F）:主要由磷鉬酸水溶液組成。

試劑（G）:主要由苯胺藍(lán)和弱酸組成。

操作步驟：

固定液應(yīng)選用甲醛鹽溶液、中性福爾馬林試劑（10%，NBF）進(jìn)行固定。

1、切片脫蠟水。

2、試劑（A）染色5min-10min。

3、試劑（B）分化、水洗。

4、試劑（C）返藍(lán)、水洗。

5、蒸餾水或者去離子水洗1min。

6、試劑（D）染色5-10min。

7、試劑（E）洗1min。

8、試劑（F）洗1-2min

9、試劑（E）洗1min。

10、直接放入試劑（G）中染色1-2min。

11、試劑（E）洗1min。

12、95%乙醇快速脫水。

13、無(wú)水乙醇（1）5-10秒。

14、無(wú)水乙醇（2）5-10秒。

15、無(wú)水乙醇（3）5-10秒。

16、二jia苯（1）1-2分。

17、二jia苯（2）1-2分。

18、二jia苯（3）1-2分。

19、中性樹膠封固。

染色結(jié)果：細(xì)胞核呈藍(lán)色、胞漿、肌肉、紅細(xì)胞呈紅色，膠原纖維/蛋白呈藍(lán)色。

注意事項(xiàng)：

1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。

2、組織固定起著非常重要的作用，使用不同的固定液或縮短染色時(shí)間

3、經(jīng)典masson三色染色中，常要求使用試劑A染核，也可用Harris 蘇木精染核，但Harris 蘇木精染核后切片顏色不夠鮮艷，因?yàn)樯康闹饕谟趨^(qū)分膠原纖維和肌纖維，一般也可以省略該染色步驟。

4、試劑B的分化時(shí)間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和新舊而定。

5、試劑E為0.2%乙酸水溶液，可使色彩更清楚鮮艷、如果使用量大可自行配制。

6、用試劑F分化要在鏡下控制，分化到膠原纖維呈淡紅色。纖維呈紅色即可。分化時(shí)間根據(jù)染色深淺而定。一般1-2min。

7、返藍(lán)液常使用氨水水溶液，亦可自行配制Scoot 促藍(lán)液或0.1-1%碳酸鋰水溶液。

8、戴一次性手套操作。

9、使用場(chǎng)所應(yīng)通風(fēng)，并遠(yuǎn)離火源。

儲(chǔ)存條件：

2-25℃ 避光