目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化指標(biāo)檢測(cè)試劑盒>> BC1230抗壞血酸(AsA)含量檢測(cè)試劑盒
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更新時(shí)間:2024-08-21 15:26:33瀏覽次數(shù):1449評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/48樣 |
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貨號(hào) | BC1230 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 抗壞血酸(AsA)含量檢測(cè) |
抗壞血酸(AsA)含量檢測(cè)試劑盒
測(cè)定意義:AsA又稱維生素C。AsA是輔酶、自由基清除劑、電子共體/受體和草酸鹽與酒石酸鹽生物合成的底物等。作為植物細(xì)胞中重要的抗氧化劑,AsA在保護(hù)葉綠體免于氧化損傷起著舉足輕重的作用,也是衡量農(nóng)作物產(chǎn)品品質(zhì)的重要指標(biāo)之一。
測(cè)定原理:抗壞血酸氧化酶(AAO)催化AsA氧化生成DHA,通過測(cè)定AsA的氧化速率,即可計(jì)算出AsA含量。
自備儀器和用品:研缽、冰、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL石英比色皿、可調(diào)式移液器和蒸餾水。
抗壞血酸(AsA)含量檢測(cè)試劑盒
操作步驟:
一、樣品中AsA提取:
按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑
一)進(jìn)行冰浴勻漿,10000rpm 4℃離心20min,取上清液待測(cè)。
二、AsA測(cè)定操作:
1.分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到265 nm,蒸餾水調(diào)零。
2.試劑二在25℃水浴鍋中預(yù)熱30 min以上。
3.標(biāo)準(zhǔn)管:依次在比色皿中加入100μL標(biāo)準(zhǔn)液、800μL試劑二和100μL試劑三,迅速混勻,在265nm測(cè)定,記錄30s和150s的吸光值A(chǔ)1和A2,△A標(biāo)準(zhǔn)管= A1-A2。
4.測(cè)定管:依次在比色皿中加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑三,迅速混勻,在265nm測(cè)定,記錄30s和150s的吸光值A(chǔ)3和A4,△A測(cè)定管= A3-A4。
三、AsA含量計(jì)算:
a.使用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1)按蛋白濃度計(jì)算
AsA (μmol/mg prot) =[C標(biāo)準(zhǔn)液×(△A測(cè)定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管×V標(biāo)準(zhǔn))÷(Cpr ×V樣)
=0.1 ×△A測(cè)定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
AsA (μmol/g ) =[C標(biāo)準(zhǔn)液×(△A測(cè)定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管×V標(biāo)準(zhǔn))÷(W ×V樣÷V樣總)
=0.1 ×△A測(cè)定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管÷W
相關(guān)文獻(xiàn):
《Effect of 1α, 25-dihydroxyvitamin D3 on the osteogenic differentiation of human periodontal ligament stem cells and the underlying regulatory mechanism》 作者:Yawen Ji, Panpan Zhang, Yixiao Xing, Linglu Jia, Yunpeng Zhang, Tingting Jia, Xuan Wu, Bin Zhao, Xin Xu 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.928 PMID:30365053
C標(biāo)準(zhǔn)液:100μmol/L;V 標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)液體,0.1mL;V樣總:上清液總體積,1.0 mL=1 ×10-3 L;
V 樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積,0.1mL ;Cpr:上清液蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣品質(zhì)量(g)。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)