過氧化氫(H2O2)含量檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品名稱：過氧化氫(H2O2)含量檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品英文名：Micro Hydrogen Peroxide(H2O2) Assay Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：BC3590                          產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣                     產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：190
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字：過氧化氫試劑盒

簡(jiǎn)要介紹：
H2O2是生物體內(nèi)常見的活性氧分子，主要由SOD和XOD等催化產(chǎn)生，由CAT和POD等催化降解。H2O2不僅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互轉(zhuǎn)化的樞紐。一方面，H2O2可以直接或間接地氧化細(xì)胞內(nèi)核酸，蛋白質(zhì)等生物大分子，并使細(xì)胞膜遭受損害，從而加速細(xì)胞的衰老和解體；另一方面H2O2也是許多氧化應(yīng)急反應(yīng)中的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子
產(chǎn)品詳細(xì)描述

商品貨號(hào)：	商品品牌：	規(guī)格	基本售價(jià)：	選擇規(guī)格
BC3590-50管/48樣	Solarbio	50管/48樣	190.00元

產(chǎn)品內(nèi)容： 
試劑一：丙tong 100mL×1 瓶，4℃保存；（自備）
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 3mL 濃鹽酸充分溶解備用。用不完的試劑 4℃保存；
試劑三：液體 6mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：液體 30mL×1 瓶，4℃保存；
標(biāo)準(zhǔn)品：液體 1mL×1 支，4℃保存，1mmol/mLH2O2標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說明： 
H2O2是生物體內(nèi)常見的活性氧分子，主要由 SOD 和 XOD 等催化產(chǎn)生，由 CAT 和 POD 等催 化降解。H2O2不僅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互轉(zhuǎn)化的樞紐。一方面，H2O2可以直接或 間接地氧化細(xì)胞內(nèi)核酸，蛋白質(zhì)等生物大分子，并使細(xì)胞膜遭受損害，從而加速細(xì)胞的衰老和解體； 另一方面 H2O2也是許多氧化應(yīng)急反應(yīng)中的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。 H2O2與硫酸鈦生成黃色的過氧化鈦復(fù)合物，在 415nm 有特征吸收。

需自備的儀器和用品： 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、丙tong、濃鹽 酸、研缽和冰。

操作步驟： 
一、H2O2提取：
1、細(xì)菌或細(xì)胞樣品的制備： 收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 試劑一，超聲 波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率 20％，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；8000g4℃離心 10min，取上清， 置冰上待測(cè)。
2. 組織樣品的制備： 稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 試劑一進(jìn)行冰浴勻漿；8000g4℃離心 10min，取上清，置冰上待 測(cè)。
3、血清（漿）樣品：按照每 100μL 血清（漿）加入 0.9mL 試劑一的比例充分混勻；8000g4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
注意事項(xiàng)：
1、由于試劑一易揮發(fā)，試劑一必須先預(yù)冷再加，研磨時(shí)必須在冰上研磨。
2、本試劑盒中試劑的揮發(fā)性較高，請(qǐng)帶一次性手套和口罩。

二、測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng) 415nm，蒸餾水調(diào)零。
2、將試劑二、三和四 37℃（哺乳動(dòng)物）或 25℃（其它物種）水浴 10min 以上。
3、如果用 96 孔板將則用丙tong將 1mmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋為 2μmol/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液，用微量玻璃比色 則用丙tong將 1mmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋為 1μmol/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
4、在 EP 管中按順序加入下列試劑 試劑名稱（μL）

加入試劑四溶解沉淀后（可先用丙tong清洗 3-5 次來洗去植物色素），室溫靜置 5min，取 200μL 轉(zhuǎn)移微量玻璃比色皿或 96 孔板中測(cè)定 415nm 處吸光值。對(duì)照管只要做一次即可。計(jì)算?A 測(cè)定=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管，?A 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 對(duì)照管。

三、H2O2含量計(jì)算： 
1、按照細(xì)菌、細(xì)胞數(shù)量計(jì)算： H2O2含量（μmol/104cell）=?A 測(cè)定÷（?A 標(biāo)準(zhǔn)÷C 標(biāo)液）×V 樣本÷(500×V 樣本÷V 提取) =0.004×?A 測(cè)定÷?A 標(biāo)準(zhǔn)。
2、按組織鮮重計(jì)算： H2O2含量（μmol/g 鮮重）=?A 測(cè)定÷（?A 標(biāo)準(zhǔn)÷C 標(biāo)液）×V 樣本÷(V 樣本÷V 提取×W) =2×?A 測(cè)定÷?A 標(biāo)準(zhǔn)÷W。
3、按照蛋白濃度計(jì)算： H2O2含量（μmol/mgprot）＝?A 測(cè)定÷（?A 標(biāo)準(zhǔn)÷C 標(biāo)液）×V 樣本÷（Cpr×V 樣本） =2×?A 測(cè)定÷?A 標(biāo)準(zhǔn)÷Cpr。
4、按血清（漿）體積計(jì)算： H2O2含量(μmol/mL)=?A 測(cè)定÷（?A 標(biāo)準(zhǔn)÷C 標(biāo)液）×10 =20×?A 測(cè)定÷?A 標(biāo)準(zhǔn)。 500：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，萬個(gè)；C 標(biāo)液：H2O2標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，2μmol/mL；V 樣本：加入的樣本 體積，0.25mL；W：組織鮮重，g；V 提?。禾崛∵^程中所用體積，1mL；Cpr：樣品蛋白濃度，mg/mL； 10：血清稀釋倍數(shù)，[0.1mL 血清（漿）+0.9mL 試劑一]÷0.1mL 血清（漿）=10。

注意：如果用微量玻璃比色皿（光徑 d=1cm）將 1mmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋為 1μmol/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液。 計(jì)算公式亦作改變。

相關(guān)文獻(xiàn)：
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《The Combination of piR-823 and Eukaryotic Initiation Factor 3 B (EIF3B) Activates Hepatic Stellate Cells via Upregulating TGF-β1 in Liver Fibrogenesis》 作者:Xuechan Tang,Xiaoli Xie,Xin Wang, Yan Wang,Xiaoyu Jiang, and Huiqing Jiang 期刊:International Medical Journal of Experimental 影響因子:1.42 PMID:30556540
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