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更新時(shí)間:2024-08-24 08:38:21瀏覽次數(shù):1113評(píng)價(jià)
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omega原裝 膠回收kit 100T/盒
貨號(hào):貨號(hào):
規(guī)格:100T/盒
商品貨號(hào): | 商品品牌: | 規(guī)格 | 基本售價(jià): | 選擇規(guī)格 |
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D2500-50T | Omega | 50T | 380.00元 |
E.Z.N.A® Gel Extraction Kit采用硅膠柱純化技術(shù),適合從各種類型各種濃度的瓊脂糖凝膠中回收100bp-20kb的DNA片段,回收率可達(dá)到60-70%,可直接應(yīng)用于酶促連接反應(yīng)、PCR擴(kuò)增、酶切以及標(biāo)記等實(shí)驗(yàn)。
此外,該試劑盒還可以用從于PCR產(chǎn)物,酶切產(chǎn)物中直接純化DNA。將目的DNA片段從瓊脂糖凝膠中切下,加入Binding Buffe水浴溶解凝膠,而后轉(zhuǎn)移HiBind®離心柱上離心結(jié)合DNA,經(jīng)兩步簡(jiǎn)單洗滌,終用Elution Buffer洗脫DNA。
快速--可以在15分鐘內(nèi)完成純化工作
可靠--適的緩沖液保證DNA純度和高回收率
安全--無(wú)須接觸有害的有機(jī)物抽提
高質(zhì)--純化的DNA適合于各種應(yīng)用
片段大--可回收大于10kb的DNA片段
膠回收試劑盒操作步驟(omega)
1. 配制瓊脂糖EB凝膠,電泳以分離DNA片段。任何類型或等級(jí)的瓊脂糖都可以使用。
我們強(qiáng)烈的推薦使用新鮮的TAE/TBE電泳緩沖液。不要重復(fù)使用電泳緩沖液,舊的電泳緩沖液PH會(huì)增加而降低DNA的回收產(chǎn)量;
2. 電泳足夠時(shí)間后,在紫外燈下小心地把所需的DNA的片段切下來(lái)。并盡量去除多余的凝膠。
注意:DNA在紫外燈下的曝光的時(shí)間不要超過(guò)30秒,同時(shí)在紫外燈下操作的時(shí)候一定要戴保護(hù)眼鏡。
3. 稱取空離心管的重量,切下帶目的片段的凝膠裝在1.5ml離心管中并稱其重量,求出凝膠塊的重量,近似地確定其體積。一般情況下,凝膠的密度為1g/ml,于是凝膠的體積與重量的關(guān)系可按下面換算:凝膠薄片的重量為0.2g 則其體積為0.2ml;加入等倍凝膠體積的Binding Buffer,把混合物置于55℃~65℃水浴中溫浴7min凝膠*融化,其間每隔2-3分鐘混勻一次;
重要提醒:在凝膠*溶解之后,注意凝膠-Binding Buffer混合物的pH值。如果其pH值大于8的話,DNA的產(chǎn)量將大大減少。觀察混合物的顏色,如果是橙色或紅色,則要加入5μl 濃度為5 M,pH為5.2的醋酸鈉,以調(diào)低其pH值。經(jīng)過(guò)這一調(diào)節(jié),該混合物的顏色將恢復(fù)為正常的淺黃色。一般情況下,使用新鮮的電泳緩沖液,凝膠-Binding buffer混合物的PH值的不會(huì)升高;
4. 轉(zhuǎn)移700μl的DNA-瓊脂糖溶液到一個(gè)HiBindTM DNA柱子,并把柱子裝在一個(gè)干凈的2ml收集管內(nèi),室溫下,10,000×g離心1min,棄去液體。
一個(gè)HiBind DNA柱子多可容納700μl的溶液,如果DNA-瓊脂糖混合物的體積大于700μl,可先轉(zhuǎn)移700μl溶液柱子,離心完后,將余下的溶液繼續(xù)加上柱子上。但是每一個(gè)HiBindTM柱子多可以結(jié)合25~30μg DNA。如果預(yù)期產(chǎn)量較大,則把樣品分別加到合適數(shù)目的柱中。
5. 將柱子重新套回收集管中,加300μl Binding BufferHiBind DNA 柱子中;室溫下,10,000×g離心 1分鐘,去棄濾出液;這一步相當(dāng)關(guān)鍵,不要忽略此步。
6. 將柱子重新套回收集管中,加入700μl SPW Wash bufferHiBind DNA柱子中,室溫下,10,000×g離心1分鐘,去棄濾出液;注:SPW Wash buffer在使用前必須按瓶子標(biāo)鑒要求用無(wú)水乙醇進(jìn)行稀釋。
7. 將柱子重新套回收集管中,重復(fù)加入700μl SPW Wash bufferHiBind DNA柱子中,室溫下,10,000×g離心1分鐘,去棄濾出液;
8. 棄去液體,將空柱子重新套回收集管中,10,000×g離心1min以甩干柱基質(zhì)殘余的液體。
這步可以去除柱子基質(zhì)上殘余的乙醇,不要省略此步―――對(duì)得到好的DNA產(chǎn)量是十分重要的。
9. 把柱子裝在一個(gè)干凈的1.5ml離心管上,加入30~50μl洗脫液或滅菌水上柱子膜上,10,000×g離心1分鐘,離心管中的溶液就是純化的DNA產(chǎn)物,保存于-20度。
如果再洗脫一次的話可以把殘余的DNA洗脫出來(lái),不過(guò)那樣的濃度就會(huì)較低。
DNA的產(chǎn)量及質(zhì)量:
把純化產(chǎn)物的樣品稀釋一定的倍數(shù)后,分別在260nm和280nm下測(cè)其光吸收值,回收得到的DNA的濃度可按以下公式來(lái)計(jì)算: DNA濃度=光吸收260×50×稀釋倍數(shù)μg/ml
長(zhǎng)度大于500bp的片段通常能純化得到80%的產(chǎn)量。 而50bp~500bp的帶則可達(dá)到55%~80%的回收率。(光吸收260/光吸收280)的比率是核酸純度的一個(gè)標(biāo)記。如果此值1.8,則意味著核酸的純度>90%。另一方面,如果純化產(chǎn)物的產(chǎn)量較低時(shí),可以用瓊脂糖EB電泳估算產(chǎn)物的濃度。
omega原裝 膠回收kit 100T/盒訂購(gòu)說(shuō)明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
運(yùn)輸說(shuō)明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái),再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái),再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。
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