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土壤亞硝酸還原酶試劑盒 微量法
測定意義:土壤亞硝酸還原酶是反硝化作用中的關(guān)鍵酶之一,參與亞硝酸鹽NO的還原反應(yīng),它的活性反映了生物降解過程中氮素的轉(zhuǎn)化效率,為氮素轉(zhuǎn)化規(guī)律的研究提供一定的依據(jù)。
測定原理:亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO,使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2—減少,即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)土壤中亞硝酸還原酶的活性。
需要的儀器,耗材:天平、、研缽、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、水浴鍋、低溫離心機。
土壤亞硝酸還原酶試劑盒 微量法
測定操作:空白管 對照管 測定管風(fēng)干土樣(g) 0.1 0.1 蒸餾水(μL) 200 試劑一(μL) 200 200 試劑二(μL) 200 200 200 混勻后,25℃反應(yīng)1h 試劑三(μL) 200 200 200 充分震蕩30s,1000rpm,4℃,離心10min 上清液(μL) 500 500 500 工作液(μL) 1000 1000 1000 充分混勻,室溫靜置顯色 10min,用蒸餾水調(diào)零,于 1mL 玻璃比色皿中測定 540nm 各管吸光值,分別記為 A 空白管、A 對照管、A 測定管。
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存。試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加10mL蒸餾水溶解。試劑三:液體10mL×1瓶,4℃保存。試劑四:液體25mL×1瓶,4℃避光保存。(使用前50℃加熱溶解)試劑五:液體25mL×1瓶,4℃保存。工作液:臨用前根據(jù)用量將試劑四和試劑五以1:1的比例混合。