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P1011-RNA抽提試劑=25:24:1(pH<5.0)
  • P1011-RNA抽提試劑=25:24:1(pH<5.0)
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貨物所在地:北京北京市

地: 北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷

更新時間:2024-07-20 21:00:06

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RNA抽提試劑=25:24:1(pH<5.0)
主要用于RNA的提取等試驗(yàn)。苯酚使蛋白質(zhì)變性,同時抑制了 RNase 的降解作用。

RNA抽提試劑=25:24:1(pH<5.0)

如果要求樣品很純,就要先用RNA抽提試劑=25:24:1(pH<5.0)抽提,這時候經(jīng)常在樣品中會有酚殘留,所以之后再用lv仿:異戊醇(24:1)抽提,將酚抽干凈,以免影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。在抽提前還要在DNA樣品中加入1/10體積的PH5.2的3M醋酸鈉,增加鹽濃度,以免DNA沉淀出來的量太少,都被抽走了。還有在抽提之前要把DNA樣品的體積擴(kuò)大,這樣也可以減少抽提過程中DNA樣品的損失。

酚要用Tris-飽和酚,如果不要求樣品很純,就只用lv仿:異戊醇(24:1)抽提就可以了
具體可以看《分子克隆》

 

組織裂解液,確保 pH 為 8.0 左右(可加入 0.1 體積的 1M Tris-HCl,pH8.0,將其調(diào)為 8.0 左右),再加入 0.5 體積的 Tris 飽和酚(使用時靜置,取下層酚相使用。上層為Tris-HCl 溶液,是為阻止酚與空氣接觸,以減緩酚的氧化),0.5 體積lv仿:異戊醇(24:1) ,振蕩 10 秒鐘后冰浴 15 分鐘。離心后取水相(上層)加等體積異丙醇沉淀 DNA,75%乙醇漂洗 1 次,微干燥后溶于適量 TE 中備用。

  Tris 飽和酚一般 PH 大于 7.8,用于 DNA 的提取。其中,酚是強(qiáng)的蛋白變性劑,可以使細(xì)胞或組織中的蛋白質(zhì)變性析出,而 Tris 的主要作用是防治止酚類氧化,若酚類氧化,則會形成醌(兩個苯環(huán)),醌含有強(qiáng)自由基,會破壞核酸結(jié)構(gòu)。同時,由于 PH 值大于 7,在堿性環(huán)境中 DNA 處于水相,RNA 處于有機(jī)相,從而分離上清,即可得到 DNA。

  Tris 平衡酚有較強(qiáng)的腐蝕性,應(yīng)盡量避免皮膚接觸或吸入體內(nèi)。如發(fā)現(xiàn)變?yōu)榧t色或棕色,表明已發(fā)生氧化,不能繼續(xù)使用。

  北京索萊寶科技有限公司自產(chǎn)產(chǎn)品 Tris 飽和酚又名 Tris 平衡酚,在堿性條件下(pH>7.8)用于 DNA 的提取,更有其他相關(guān)產(chǎn)品。

T0250 TRIS 平衡酚 solarbio 250ml

W0250 水飽和酚 solarbio 250ml

P8440 重蒸酚 solarbio 250ml

P1011 酚:lv仿:異戊醇=25:24:1(PH<5.0) solarbio 100ml/500ml

P1012 酚:lv仿:異戊醇=25:24:1(PH>7.8) solarbio 100ml/500ml

P1013 酚:lv仿=25:24(PH>7.8) solarbio 100ml/500ml

P1014 lv仿:異戊醇=24:1 solarbio 100ml/500m


 

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