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酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)已經(jīng)成為實(shí)驗(yàn)室常用的檢測(cè)蛋白含量變化的實(shí)驗(yàn)技術(shù),常用的檢測(cè)方法是用抗原包被孔板,然后用一抗和二抗檢測(cè)抗原的變化。這里使用兩種抗體的原因一方面是信號(hào)放大的需要,另一方面是要減少成本。假如每種抗體都用酶或者熒光素標(biāo)記的話,那將會(huì)需要多少種標(biāo)記的抗體呢?而且可以肯定價(jià)格一定不菲。而用標(biāo)記二抗的方法就可以大大減少需要標(biāo)記抗體的數(shù)目,同時(shí)也能提高標(biāo)記抗體的效用,這樣就能用盡量少的標(biāo)記抗體滿足盡量多的實(shí)驗(yàn)要求。
人類成纖維細(xì)胞(多種種屬)實(shí)驗(yàn)科研認(rèn)可品牌
脂聯(lián)素ELISA試劑盒
檢測(cè)范圍:歡迎QQ或電話索取原版說(shuō)明書.
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T。
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
經(jīng)營(yíng)種類:進(jìn)口分裝和原裝、國(guó)產(chǎn)
性狀:盒裝液體
試劑盒保存:2-8℃低溫保存。
標(biāo)本:血清、、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等。
預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定血清、、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
脂聯(lián)素ELISA試劑盒試劑盒(多種屬)行業(yè)操作流程如下:(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。 (2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF工作液50μl。?。?)酶標(biāo)板置37℃箱的濕盒內(nèi),孵育60min?!。?)洗板,同(4)。?。?)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔工作液 100μl?!。?)酶標(biāo)板置37℃箱的濕盒內(nèi),孵育60min?!。?)洗板,同(4)?!。?0)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min?!。?1)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)?!。?2)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以由容器上的劃痕或指印等造成的光。(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定。
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編輯:小檀20181010
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