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關(guān)鍵詞:抗體定制服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
簡介:世界*品牌抗體定制服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)原裝,質(zhì)量保證,*。
抗體定制|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系。
我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)操作技巧,承諾客戶不成功不收費(fèi)。我們所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可信,我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒,客戶可以依據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)報(bào)告重復(fù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
產(chǎn)品品牌:抗體定制服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù) http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
測序?qū)嶒?yàn)流程:
抗體檢測服務(wù)
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn))
Dot Blot(斑點(diǎn)印跡實(shí)驗(yàn))
Western Blot(免疫印跡實(shí)驗(yàn))
IHC (免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn))
抗體標(biāo)記服務(wù)
HRP(辣根過氧化物酶)
Biotin(生物素)
實(shí)驗(yàn)流程:
第0天: 進(jìn)行*次免疫
第1-10天: 加強(qiáng)免疫
第14天: ELISA測定血清滴度
第18天: 融合
第36天: 克隆初篩
第40天: 克隆復(fù)篩
第46天: 克隆擴(kuò)增,提供培養(yǎng)上清
原
制備 提供多肽序列,或Genbank號(hào),公司負(fù)責(zé)合成多肽,偶聯(lián)KLH及偶聯(lián)檢測載體BSA(OVA) 2周 多肽合成,10mg純度>95% ¥128/A
偶聯(lián)KLH 2mg ¥1280
偶聯(lián)BSA(或者OVA) 2mg ¥780
客戶只提供Genbank號(hào) 4周 構(gòu)建含有客戶認(rèn)可抗原序列的原核表達(dá)載體,進(jìn)行蛋白表達(dá)純化,制備可供免疫的抗原 ¥4000
客戶提供能正常表達(dá)的菌株 2周 進(jìn)行表達(dá)、純化制備免疫抗原 ¥2000
客戶選擇真核表達(dá) 4周 構(gòu)建含有Flag標(biāo)簽的真核表達(dá)載體,293細(xì)胞表達(dá)目的抗原,用偶聯(lián)Flag單抗的beads親和純化目的融合蛋白作為抗原 詢價(jià)
提取天然蛋白 2周 提取天然蛋白zui為抗原 詢價(jià)
免疫 三次免疫后(效價(jià)達(dá)不到融合要求繼續(xù)免疫)測尾血效價(jià) 5周 免疫5只Bablc小鼠,免疫量50ug/只,zui終達(dá)到融合效價(jià)>1:10000 ¥1000
加強(qiáng)
免疫 融合前3-5天加強(qiáng)免疫 1天 蛋白透析,無佐劑50ug/只 ¥50
融合 PEG1450 (sigmaP7306)
HAT(Invitrogen 21060017 )血清(Hyclone SH30084.03 ) 1天 取脾臟分離成單細(xì)胞與對(duì)數(shù)期的SP2/0按5:1混合,進(jìn)行細(xì)胞融合,20%胎牛血清,HAT選擇培養(yǎng)基,鋪10塊96孔板 ¥5000
上清
檢測 融合7天后,ELISA檢測,用檢測抗原包被ELISA板,二抗anti-mouse HRP,TMB顯色 1天 陰性(正常培養(yǎng)基)OD<0.1陽性O(shè)D>0.5視為陽性孔 ¥2000
亞克隆 對(duì)陽性孔采用有限稀釋法進(jìn)行亞克隆直到含有細(xì)胞的所有孔均為陽性 4周 ELISA檢測挑選OD值高的細(xì)胞孔,進(jìn)行后續(xù)亞克隆直到含有細(xì)胞的所有孔均為陽性 ¥8000
定株 陽性穩(wěn)定的孔進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng) 1周 擴(kuò)大培養(yǎng)上清,按客戶要求進(jìn)行功能檢測(WB/ELISA/IHC),滿足客戶要求后,將應(yīng)客戶要求交付細(xì)胞(每株細(xì)胞2管) ¥5000
腹水 細(xì)胞株生產(chǎn)10mL腹水 1周 離心后10mL腹水 ¥2000
亞型 應(yīng)客戶要求測定細(xì)胞株亞型 1周 采用(Sigma ISO2)測定亞型 ¥2000
純化 ProteinA 或G純化10mL腹水 1周 根據(jù)亞型選擇ProteinA 或G ¥2000
配對(duì) 純化后的抗體進(jìn)行競爭實(shí)驗(yàn) 3周 確定不同克隆之間是否配對(duì) 詢價(jià)
標(biāo)記 FITC/HRP/BIOTIN/AP等 1周 應(yīng)客戶要求對(duì)抗體進(jìn)行標(biāo)記 詢價(jià)
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