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ACE C18-AR色譜柱介紹Ⅳ - 耐久性柱壽命更出色的C18色譜柱

2019-4-15  閱讀(1406)

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ACE C18-AR色譜柱為高溫應(yīng)用提供的鍵合相穩(wěn)定性

溫度和pH穩(wěn)定性
在低pH值時,色譜柱退化是由鍵合相的水解所致,同時觀察到保留值降低。

鍵合相的性質(zhì)、硅膠表面的純度和鍵合密度都是關(guān)鍵參數(shù)。

使用較低純度的硅膠、較短的配體和較低的鍵合密度都是有助于加速配體斷裂和降低柱壽命的因素。

 

酸性暴露條件:

流動相: 5:95 甲醇/0.1%TFA(溶于水中)(pH 1.9)

色譜柱尺寸:50 x 2.1mm
流速: 0.20ml/min 0.20ml/min
溫度: 80°C

 

使用設(shè)計用于加速柱降解的條件,ACE C18-AR色譜柱顯示保留損失極低,其壽命與高度穩(wěn)定的ACE C18色譜柱相當(dāng)。

兩相均采用相同的超純硅膠制造,并且這兩種固定相比Zorbax SB C18耐久性更好(Zorbax SB C18是一種之前被認可的、可在高溫和低pH應(yīng)用中提供出色穩(wěn)定性的固定相)。
正如預(yù)期,基于低純度硅膠(Waters Spherisorb ODS2)的C18鍵合色譜柱在這些加速條件下顯示壽命大大降低。
特別值得注意的是刢先的苯基色譜柱與ACE C18-AR色譜柱之間的壽命比較結(jié)果。

盡管使用了超純硅膠,但與ACE C18-AR色譜柱相比,苯基色譜柱的使用壽命降低,這表明ACE C18-AR色譜柱可能適用于常規(guī)苯基色譜柱呈現(xiàn)壽命降低的應(yīng)用。

 

應(yīng)用#4 - 鎮(zhèn)痛劑分離

化合物:1)4-乙酰氨基苯酚2)4-氨基苯甲酸3)4-羥基苯甲酸4)咖啡茵5)2-乙酰氨基苯酚6)3-羥基苯甲酸7)氺楊酰胺8)乙酰苯胺9)苯酚 10)乙酰氺楊酸11)苯甲酸12)山梨酸13)氺楊酸14)phenylacetin 15)氺楊醛
色譜柱尺寸:150 x 4.6mm

流速:1.00ml/min

溫度:40°C

檢測:UV, 240nm

流動相:

A. 0.1% v/v甲酸(溶于水中)

B. 0.1% v/v甲酸(溶于乙腈中)

梯度: 時間(分鐘) %B
                  0             5
                  9             35

上述應(yīng)用顯示在ACE C18色譜柱上分離鎮(zhèn)痛劑時,可以觀察到4對共洗脫峰。

該分離也與其他刢先的C18柱品牌可以預(yù)期的結(jié)果相同,由于相同(主要是疏水性)的相互作用,它們顯示選擇性極為相似。
基于與ACE C18相同的超惰性、超高純度硅膠平臺,讀特的ACE C18-AR相可以提供替代選擇性來使所有15種組分分離,包括之前確定的4個關(guān)鍵對。

經(jīng)發(fā)現(xiàn),證實不適合ACE C18的相同評估條件可以適用于ACE C18-AR柱,這就避免了冗長的方法再開發(fā)。

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