使用石油醚作為溶劑,采取Randall改進的索氏方法抽提脂肪。測試樣品在用冷的溶劑淋洗前先浸入沸騰的溶劑,這減少了抽提所需的時間。溶劑溶解了脂肪、油、色素和其他可溶物質(zhì)。在浸提完成后,溶劑被蒸發(fā)并通過冷凝被回收。殘留的脂肪結果在干燥后通過重量測定獲得。
這是為了確保在浸提過程中有適當?shù)脑噭┬省?/div>
推薦的樣品重量為0.5-1g。
FOSS應用簡報 Application Note
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(8)分析細節(jié)
8.1 抽提
8.1.1 浸提之前樣品的預干燥
樣品和濾紙筒在103±2°C干燥2小時。假如干燥的樣品先不浸提,存儲在干燥器中。溶劑和測試樣品不能含有水分,以防止水溶性的物質(zhì)如碳水化合物、尿素、乳酸、甘油等被提取出來,從而導致錯誤的高值。
脂肪含量高的物質(zhì)在預干燥過程中可能會融透到濾筒上,可以添加吸附劑如硅藻土到樣品中。或者可以添加脫脂棉吸收預干燥過程中融出的脂肪。如果樣品在103°C融化,干燥時應將浸提杯放置在濾紙筒之下,以接收未被吸收和穿過濾紙筒的脂肪。
8.1.2 浸提杯干燥及稱重流程
放置5-10顆玻璃珠到浸提杯中,在對流恒溫烘箱中103°C干燥。在稱重前杯子應在干燥器中冷卻到室溫。
在浸提過程后,杯子也要被干燥/冷卻并再次稱重。稱量浸提杯需精確到0.1mg的精度。
在大多數(shù)條件下干燥和冷卻的推薦時間如表1 所示。
表1 推薦的浸提杯干燥和冷卻的時間
杯子類型 103°C 下的干燥時間(分鐘) 在干燥器中冷卻的時間(分鐘)
在浸提之前 在浸提之后 沒有杯架 帶杯架
鋁杯 ≥ 30 30 45 60
玻璃杯 ≥ 50 50 75 75
注意杯子應干燥到重量穩(wěn)定。干燥時間可能需要根據(jù)使用的烘箱型號進行調(diào)整(空氣對流烘箱、真空烘箱等
等)浸提杯洗滌變濕后至少需要2 小時的干燥時間。注意在浸提過程后對杯子進行過量的干燥可能使脂肪氧
化得到更高的結果
冷卻時間可能需要根據(jù)干燥器類型/尺寸進行調(diào)整。在浸提前和浸提后的杯子干燥,應使用同樣的干燥器冷
卻時間。
8.1.3 冷凝器密封圈
對應溶劑選擇合適的冷凝器密封圈。如何選擇請參照用戶手冊。
8.1.4 Soxtec 8000設置
浸提程序設置
推薦浸提程序設置和溶劑用量見"分析步驟"的表2。注意溫度可能需要優(yōu)化,如下所述。
優(yōu)化溫度設置
在浸提過程中,正確的加熱板溫度設置是取得好的溶劑回流不能少的要點。推薦回流滴數(shù)為3-5滴/秒。
如何檢查和調(diào)節(jié)滴數(shù)參考用戶手冊。
溶劑的溫度設定根據(jù)其沸點,但可能需要調(diào)節(jié)。假如通風櫥中的空氣流顯著大于推薦值,在浸提過程中會
使浸提杯冷卻下來。假如使用太高的溫度設置,溶劑沸騰過于劇烈,對于個別類型樣品會增加發(fā)泡的危險
和脂肪的損失。蒸發(fā)階段可浸提物質(zhì)的氧化風險也會增加。
(9)分析步驟
9.1 準備
1.加5-10 顆玻璃珠到每個浸提杯。干燥并冷卻,稱重并記錄其重量。放置浸提杯到杯架上。
2.裝配濾筒接頭到濾筒上。在天平里使用濾筒支架,稱取樣品到濾筒中,記錄重量并轉(zhuǎn)移濾筒到濾筒架或者濾筒對接工具上。
3.放一層薄薄的脫脂棉在每個樣品的頂部,并將其按到濾筒的中間。在103±2°C 烘箱中干燥包含樣品的濾筒2小時。詳見"分析細節(jié)"。
9.1.1 抽提
表 2 浸提程序設定和溶劑用量
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溶劑杯子類型溶劑量(ml) 推薦溫度(°C) 沸騰/淋洗/回收時間(min)
石油醚 40-60°C 鋁杯 85 90 20/40/8
玻璃杯 85 160 20/40/8
1.按控制單元上的電源鍵并且完全打開用于冷凝器的冷卻水龍頭。
2.在控制單元上選擇程序,根據(jù)表3 或者具體的應用簡報設置加熱板溫度和沸騰、淋洗、回收的時間。
3.檢測超溫設置。假如需要可調(diào)節(jié)。
4.檢查確認溶劑回收瓶是空的。
5.按下樣品桿下降按鈕并且插入濾筒對接工具,使濾筒連接到樣品桿上。按下樣品桿上升按鈕并拉出濾筒對接工具。
6.插入放好浸提杯的杯架。按下冷凝器下降按鈕壓緊冷凝器、杯子到加熱板上。
7.通過瓶口分配器和溶劑添加轉(zhuǎn)盤往每個杯子內(nèi)加入85ml溶劑。第一個位置多加額外的5ml以補償在閥門管道中的死體積。
注意:確認所有的杯子在對接好的位置上,避免在添加時有溶劑溢出。
8.按下控制單元上的開始按鈕,浸提程序?qū)⒆詣訄?zhí)行。
9.1.2 浸提結束
1.浸提完成后,按冷凝器上升按鈕并移出杯架。
2.為了從樣品桿上移出所有濾筒,需插入濾筒對接工具,按下樣品桿下降按鈕。當樣品桿完全降下后拉出濾筒對接工具。
3.排空溶劑回收瓶,放回抽屜中。
4.干燥杯子,稱重并記錄重量。
5.計算結果,見10計算
(10)計算
用下列公式計算脂肪含量
W3 - W2
% 脂肪 = ----------- x 100
W1
W1 = 樣品重(g)
W2 = 浸提杯重量(g)
W3 = 浸提杯重量+殘渣重(g)
11 方法性能數(shù)據(jù)
這個性能測試比較參考表3。參考方法使用的是Soxted 2050 提取系統(tǒng)。
這些值來自于3個不同批次的六個樣品中,樣品重量除了Tortilla chips 為1g 外,其余為0.8g。
樣品類型
Soxtec 8000 Soxtec 2050
Mean (%fat) n=6* SD Mean (%fat) n=6* SD n=6
不同批次
Potato chips 34,79 0,25 34,83 0,11
Tortilla chips 18,38 0,21 18,39 0,27
Cheez doodles 27,91 0,19 28,00 0,13
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