精子冷凍保護(hù)劑

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

      正常精液是一種混合物，由睪丸和附睪的分泌物及懸浮其中的精子與前列腺、精囊腺和尿道球腺的分泌物混合而成，終射出的混合物是一種粘稠的液體。精子分析的方法有很多，其中可通過培養(yǎng)進(jìn)行檢測(cè)。隨著生殖工程技術(shù)的興起及發(fā)展，供精人工授精（AID）已經(jīng)成為治療某些不可恢復(fù)或無法治療的男性不育癥的重要療法，其中精液冷凍是其中的重要環(huán)節(jié)。在一定的低溫條件下，以一定的時(shí)間作用于生物組織細(xì)胞，引起細(xì)胞的降溫、凝固、非損傷性結(jié)冰，使生物體內(nèi)分子運(yùn)動(dòng)的速度減慢、停止，從而使細(xì)胞代謝降低，處于休眠狀態(tài)，達(dá)到貯存細(xì)胞的目的。

         精子冷凍保護(hù)劑主要由甘油、葡萄糖、枸櫞酸鈉、抗生素等組成，經(jīng)無菌處理，其基本原理是在細(xì)胞冷凍過程中隨著溫度不斷下降，細(xì)胞外液中作為各種電解質(zhì)溶劑的水分首先形成細(xì)小的顆粒狀冰晶，導(dǎo)致細(xì)胞外水份減少，電解質(zhì)濃度增加，細(xì)胞外液滲透壓升高，使細(xì)胞內(nèi)外液滲透壓失去平衡，水分將從滲透壓低的內(nèi)液通過細(xì)胞膜流向滲透壓高的外液，于是細(xì)胞自身脫水皺縮，用冷凍過程中產(chǎn)生的滲透壓的梯度使細(xì)胞皺縮，而不損傷細(xì)胞。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

自備材料：

1、 程序冷凍儀

2、 水浴箱、恒溫培養(yǎng)箱

3、 冰箱、液氮罐、冷凍管

4、 1ml 注射器

操作步驟(僅供參考)：

(一)人類精液快速冷凍步驟

1、精液取出后，在 37℃的水浴箱中液化。

2、精液液化后按照 WHO 的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行常規(guī)分析，包括精液量、顏色、氣味、PH 值、液化

狀況、精子密度、活動(dòng)率、圓細(xì)胞數(shù)等，并做好相關(guān)記錄。

3、提前將冷凍保護(hù)劑復(fù)溫至室溫。

4、將精液與冷凍保護(hù)劑按 1:1 的比例混勻，并分裝于冷凍管中，冷凍管做好標(biāo)記。

5、將冷凍管置入 4℃冰箱 15min。

6、將冷凍管置入－80℃液氮蒸氣中 15min。

7、將冷凍管投入液氮中凍存。

(二)人類精液程序冷凍步驟

1、精液取出后，在 37℃的水浴箱中液化。

2、精液液化后按照 WHO 的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行常規(guī)分析，包括精液量、顏色、氣味、PH 值、液化

狀況、精子密度、活動(dòng)率、圓細(xì)胞數(shù)等，并做好相關(guān)記錄。

3、提前將冷凍保護(hù)劑復(fù)溫至室溫。

4、將精液與冷凍保護(hù)劑按 1:1 的比例混勻，并分裝于冷凍管中，冷凍管做好標(biāo)記。

5、將冷凍管置于程序冷凍儀中，開始程序冷凍。冷凍程序如下：

1）開始溫度：20℃平衡 5-10min；2）20℃→0℃，冷凍速率-1℃/min；3）0℃→-30℃，

冷凍速率-6℃/min；4）-30℃→-80℃，冷凍速率-30℃/min。

6、從程序冷凍儀中取出冷凍管，投入液氮中凍存。

(三)復(fù)蘇步驟

冷凍過程中精子發(fā)生的一系列變化也會(huì)表現(xiàn)在解凍時(shí)的反向順序中，而快速復(fù)溫

(100℃/min 左右)可避免精液在溶解前的再次形冰晶成，具體步驟為：將貯存于液氮中的精

液冷凍管取出，快速放入 37℃的水浴箱中復(fù)溫即可。

注意事項(xiàng)：

1、 注意無菌操作，盡量避免污染。

2、 影響精液冷凍貯存的因素主要有：冷凍程序、冷凍保護(hù)劑、復(fù)蘇速率、貯存方式，及冷

凍前精液質(zhì)量等。

3、 人們多使用液氮來貯存精液，液氮是一種無色、無味的氣體，其沸點(diǎn)為－195.8℃。具

有低溫、不助燃、不自燃、不易爆炸、來源豐富的優(yōu)點(diǎn)。

有效期：6 個(gè)月有效。4℃保存 1 周有效。