尿蛋白檢測(cè)試劑盒（麗春紅比色法）說明書

產(chǎn)品簡介：

在尿液樣本中加入蛋白沉淀劑和麗春紅S，離心，蛋白質(zhì)-染料復(fù)合物被沉淀下來，將沉淀物加入堿性溶液溶解后，分光光度法檢測(cè)560nm處吸光度，計(jì)算蛋白含量。Leagene 尿蛋白檢測(cè)試劑盒(麗春紅比色法)主要用于定量檢測(cè)尿液中蛋白含量，較雙縮脲法靈敏，對(duì)白蛋白的敏感性比球蛋白要高。

 產(chǎn)品組成：

自備材料：

1. 蒸餾水
2. 離心管、試管
3. 比色杯、分光光度計(jì)

操作步驟(僅供參考)：

1. 取適量麗春紅S試劑(10×)，按1:9加入蒸餾水，稀釋至1×，室溫可保存2～3個(gè)月。
2. 取1ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液加入到蛋白標(biāo)準(zhǔn)(BSA)中，充分溶解后配制成20mg/ml的蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液，配制后可立即使用，溶解后的蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)-20℃保存。
3. 取適量20mg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)，稀釋至濃度分別為0、200、400、600、800、1000、1200、1600μg/ml或所需濃度。特別提示：待測(cè)蛋白溶解于什么樣的稀釋液中，蛋白標(biāo)準(zhǔn)也宜溶解于什么樣的稀釋液中；例如待測(cè)蛋白溶解于蔗糖中，亦取20mg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶解于蔗糖中，一般也可以用0.9%NaCl或PBS作為溶解BSA稀釋液。稀釋后的蛋白標(biāo)準(zhǔn)也應(yīng)-20℃長期保存。
4. 制作蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線： 各取100μl上述稀釋度的蛋白標(biāo)準(zhǔn)， 與測(cè)定樣本操作相同（見第6步） 。”0”號(hào)管空白調(diào)零，比色杯光徑1cm，560nm比色，制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。

       5.半定量實(shí)驗(yàn)：取3～5ml新鮮尿液轉(zhuǎn)移入小試管，滴加磺基水楊酸溶液3～4滴，形成界  面，立即觀察，如有渾濁，提示尿液中含有蛋白質(zhì)，渾濁深淺表示含量多少。?

        6.取離心管，根據(jù)上述半定量實(shí)驗(yàn)測(cè)得的蛋白濃度按下表要求加入待測(cè)樣本和蒸餾水，再加入1ml 1×麗春紅S試劑，混勻。3500g離心10min，將上清緩緩倒出后，倒置于濾紙上數(shù)分鐘，用濾紙條吸附管壁上多余的試劑(勿觸及管低沉淀)。再加入2ml Alkaline Buffer至沉淀中，充分混合使沉淀溶解。