痰液、體液、糞便等組織樣本是常用的微生物學(xué)檢驗(yàn)樣本，常含有多種微生物成分，且自身成分復(fù)雜，由于結(jié)核分歧桿菌對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求高、生長(zhǎng)緩慢，培養(yǎng)時(shí)若標(biāo)本中含有其他雜菌，雜菌一般生長(zhǎng)較快、易消耗營(yíng)養(yǎng)，不利于結(jié)核分歧桿菌的檢出，因此對(duì)于可能含有雜菌的樣本(如痰標(biāo)本、消化道標(biāo)本、支氣管肺泡灌洗液和經(jīng)支氣管吸出液等），培養(yǎng)前均需要對(duì) 其進(jìn)行前處理以液化標(biāo)本、殺死雜菌；尿液、尸檢組織和其他任何污染的液體標(biāo)本，均需在培養(yǎng)前進(jìn)行去污處理，而血、腦脊液、關(guān)節(jié)液等來(lái)自機(jī)體無(wú)菌部位的無(wú)雜菌污染的標(biāo)本，可以直接離心后取沉淀接種。常用的標(biāo)本前處理消化試劑有硫酸、氫氧化鈉、N-乙酰-L-半胱氨酸(NALC)、苯扎溴銨、草酸、胰酶、二硫蘇糖醇(DTT)等，Leagene 痰消化液(分支桿菌專用型)主要由N-乙酰-L-半胱氨酸、氫氧化鈉和檸檬酸鈉等組成，經(jīng)無(wú)菌處理，可直接用于含結(jié)核桿菌的痰液樣本的均質(zhì)化操作。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

編號(hào) 名稱	規(guī)格一 100ml	規(guī)格二 500ml	Storage
試劑 A：檸檬酸鈉緩沖液	100ml	500ml	RT
試劑 B：N-乙酰-L-半胱氨酸	0.5g	2.5g	RT
使用說(shuō)明書	1 份

自備材料：

1、痰液、體液、糞便等組織樣本

2、生理鹽水、PBS

3、接種環(huán)

4、離心管、離心機(jī)

5、培養(yǎng)基

6、剪刀、研缽

操作步驟(僅供參考)：

配制痰消化液(NALC 溶液）：稱取0.5g NALC 加入到100ml 的檸檬酸鈉緩沖液，*溶解，即成0.5%的NALC 溶液；該溶液可4 度保存，24~48h 有效。

(一)痰液樣本：

1、挑起約 5ml 濃痰液至已標(biāo)記的 50ml 離心管中。

2、加入等量的痰消化液進(jìn)行均質(zhì)化處理，渦旋震蕩 20s，30~37℃靜置 15~20min。

3、加入無(wú)菌 PBS(pH6.8 左右)至約 50ml，3000r/min 離心 15min。

4、倒掉上清液，添加 PBS 1~3ml 。(二)體液樣本：

1、無(wú)菌體液直接接種，取 10ml 體液于離心管中離心，取沉淀物直接接種。

2、污染的體液操作同痰液標(biāo)本。(三)組織樣本：

1、取 1g 組織用剪刀剪碎加入 5ml 培養(yǎng)基，用研缽將組織制作成勻漿，加入 50ml 離心管。

2、以下操作同痰液標(biāo)本。(四)糞便樣本：

1、取 1g 糞便加入到 50ml 離心管中，并向其中加入 5ml 培養(yǎng)基，混勻。

2、以下操作同痰液標(biāo)本。

注意事項(xiàng)：

1、痰液樣本易在清晨采集，采集前先以冷開水充分漱口，以免口腔正常菌群污染樣本。

2、尿液樣本易收集早晨第一次尿的中段尿?yàn)橐恕?/span>

3、樣本采集后應(yīng)立即送檢。

4、如樣本用于結(jié)合桿菌的檢查，痰量要多。

5、肺部感染的樣本可能患有菌血癥，應(yīng)同時(shí)做血液培養(yǎng)。

6、 NALC 溶液應(yīng)根據(jù)使用量酌量配制，不易長(zhǎng)期保存。

7、結(jié)核菌有傳染性，需小心操作，以防感染。

有效期：12 個(gè)月有效；室溫保存，NALC 溶液 4℃可短期保存。

痰消化液(分支桿菌專用型)說(shuō)明書

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