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Jurkat,,人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞說明書

時間:2025/1/10閱讀:144
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細(xì)胞名稱:

Jurkat,,人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞

產(chǎn)品貨號:

JR6987

規(guī)格:

T25瓶或者2ml凍存管

生長特性:

懸浮生長

傳代比例:

持細(xì)胞濃度在1×105~2×106/ml 

培養(yǎng)條件:

89%RPMI-1640,10%胎牛血清(優(yōu)質(zhì)),1%雙抗,37℃, 5% CO2

凍存條件:

70%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO



僅供科研使用,不可用于臨床診斷和治療

凍存細(xì)胞接收后的處理:

1)干冰運輸,收到細(xì)胞后推薦直接復(fù)蘇1管,另一管放入-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮,細(xì)胞直接轉(zhuǎn)入液氮暫存可能導(dǎo)致細(xì)胞復(fù)蘇率降低。

2)收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已經(jīng)揮發(fā)、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照后與我們聯(lián)系。

注:收到凍存細(xì)胞后請先復(fù)蘇一管,如有問題請及時反饋,我們指導(dǎo)您復(fù)蘇第二管,請勿2管一起復(fù)蘇。

復(fù)蘇細(xì)胞接收后的處理:

1)收到細(xì)胞后,請首先檢查培養(yǎng)瓶是否破損或漏液,培養(yǎng)液是否混濁,如有漏液及培養(yǎng)液混濁情況請立即拍照把圖片發(fā)給我們。

2)在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)并拍照100倍和200倍的照片2~3組以及培養(yǎng)瓶外觀照留存。

3)75%酒精消毒瓶身后放培養(yǎng)箱中靜置4-6h后鏡檢觀察細(xì)胞密度未達(dá)到80-90%時,將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,離心后棄去上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入T25培養(yǎng)瓶或60mm皿中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基。

4)如您收到細(xì)胞7天內(nèi)沒有反饋相關(guān)問題,出現(xiàn)的細(xì)胞問題將不提供免費重發(fā)服務(wù)。

注:發(fā)貨用培養(yǎng)基不可再次用來培養(yǎng)細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm離心5min,小心棄去上清;

②加1-2ml新鮮培養(yǎng)基吹勻重懸后按照1:2比例加入2個T25培養(yǎng)瓶或60mm皿中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

注:第一次傳代推薦1:2傳代,后續(xù)可根據(jù)細(xì)胞生長以及客戶需求自行確定。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml新鮮培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶或者60mm培養(yǎng)皿中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存

①收集所有細(xì)胞懸液,可細(xì)胞計數(shù),1000rpm離心5min,棄上清;

加入配制好的凍存培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,凍存液的添加量按細(xì)胞最終濃度為1~10×106/ml添加。

將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

 

 

 


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