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TMB底物顯色試劑盒(ELISA,HRP顯色)產(chǎn)品介紹

時(shí)間:2025/3/14閱讀:88
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產(chǎn)品簡介:

3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)是非常優(yōu)秀的酶免試驗(yàn)顯色劑,能溶解于多種有機(jī)溶劑和雙蒸水中,為穩(wěn)定的無色溶液,與適量過氧化脲或雙氧水與緩沖液混勻后與過氧化物酶作用產(chǎn)生清晰的藍(lán)色產(chǎn)物,極易觀察。由于其靈敏度高,配制后的工作液穩(wěn)定,加上無致癌特性,被廣泛用于酶聯(lián)免疫(ELISA)試驗(yàn)和尿試紙的檢測反應(yīng)等,TMB主要應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA),經(jīng)典的方法是采用A、B液分開配制,使用前再混合的方法,并且長期存放穩(wěn)定,本試劑一般情況下為無色,有時(shí)略顯淺藍(lán)色或淺黃色。

TMB底物顯色試劑盒(ELISA,HRP顯色)主要由TMB顯色液、TMBBuffer、TMB氧化劑組成,其特點(diǎn)是:1、靈敏度高;2、穩(wěn)定性好,顯色終止后讀數(shù)穩(wěn)定;3、背景低:底物溶液在450nm檢測時(shí)OD值一般小于0.05。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。 

自備材料:

1、酶標(biāo)儀、酶標(biāo)板或 96 孔板、恒溫箱(備選)

2、(備選)終止液:鹽酸或硫酸等

 

操作步驟(僅供參考)

1、用適當(dāng)?shù)母蓛羧萜?/span>(用純凈水反復(fù)沖洗),取試劑(A)、(B)、(C),按 ABC= 500050004的比例混合,即為 TMB 顯色工作液,待達(dá)到室溫后即可使用。

2、加液:加完 HRP 結(jié)合物并溫育一定時(shí)間,洗板 35 次,每孔加 TMB 顯色工作液 100 μl,在室溫(1525℃)37℃下溫育 1030 分鐘。

3、(選做)終止:加等體積的1M 鹽酸或硫酸溶液終止反應(yīng),孔中反應(yīng)液由藍(lán)色變?yōu)辄S色。

4、讀數(shù):30min內(nèi)在 450nm處讀數(shù)。

 

注意事項(xiàng):

1、本試劑盒給予的TMB氧化劑多于實(shí)際使用量,請按比例使用。

2、TMB 氧化劑易揮發(fā),請注意密閉保存,以免效率下降,一旦開封請盡快使用。

3、TMB 氧化劑有腐蝕性,請勿直接接觸于人皮膚、毛發(fā)等。

4、如果出現(xiàn)高的反應(yīng)背景或沉淀,表明 TMB 底物反應(yīng)過于強(qiáng)烈。

5、終止反應(yīng)不是必須步驟,如不加終止液應(yīng)顯色完成后立即檢測。

6、一般市售的濃鹽酸為11.6M,濃硫酸為18.3M,但應(yīng)注意其揮發(fā)性。

7、為了避免產(chǎn)生沉淀,可在終止后馬上讀數(shù),或者進(jìn)一步稀釋一抗和/或 HRP結(jié)合物,再次進(jìn)行試驗(yàn)。

8、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

有效期12個月內(nèi)有效;4℃運(yùn)輸,4℃保存。


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