色的物質(zhì)濃度時要用zui大吸收的波長的入射光，這樣測量的靈敏度zui高。
2、 同一種物質(zhì)，若濃度不同，則對同一波長的入射光的吸收能力（吸光度）也不同，且成正比關(guān)系。
3、
應(yīng)此，利用特定波長的單色光（通常用zui大吸收波長的入射光）照射不同濃度的某一溶液時，所得的吸光度大小應(yīng)與溶液濃度呈線性關(guān)系，故可利用該線性關(guān)系通過計算或查標(biāo)準(zhǔn)曲線來求得未知溶液的濃度。

（五） 吸光光度法特點：
1． 靈敏度高：mg%級、甚至ug%級。
2． 準(zhǔn)確度高：誤差2-5%
3． 操作簡便、快速，儀器設(shè)備不復(fù)雜，價格低廉，故應(yīng)用廣泛。

分光光度計的使用：
（一） 分光光度計的基本原理：利用吸光光度法的原理，采用棱鏡或光柵等分光器獲得純度較高的單色光
來測量未知溶液的濃度的方法。

（二） 常用分光光度計：可見光、紫外、紅外分光光度計，
熒光分光光度計，火焰分光光度計等。

（三） 722 型分光光度計的結(jié)構(gòu)（略）

（四） 分光光度計的操作步驟

1）預(yù)熱儀器。為使測定穩(wěn)定，將電源開關(guān)打開，使儀器預(yù)熱20min，為了防止光電管疲勞，不要連續(xù)光照。預(yù)熱儀器時和在不測定時應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷。

2）選定波長。根據(jù)實驗要求，轉(zhuǎn)動波長調(diào)節(jié)器，使指針指示所需要的單色光波長。

3）固定靈敏度檔。根據(jù)有色溶液對光的吸收情況，為使吸光度讀數(shù)為0.2-0.7，選擇合適的靈敏度。為此，旋動靈敏度檔，使其固定于某一檔，在實驗過程中不再變動。一般測量固定在“1”檔。

4）調(diào)節(jié)“0”點。輕輕旋動調(diào)“0”電位器，使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處（此時，比色皿暗箱蓋是打開的，光路被切斷，光電管不受光照）。

5）調(diào)節(jié)T=100％。將盛蒸餾水（或空白溶液或純?nèi)軇┑谋壬蠓湃氡壬笞苤械?格內(nèi)，有色溶液放在其它格內(nèi)，把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上，轉(zhuǎn)動光量調(diào)節(jié)器，使透光度T=100％，即表頭指針恰好指在T=100％處。

6）測定。輕輕拉動比色皿座架拉桿，使有色溶液進入光路，此時表頭指針?biāo)緸樵撚猩芤旱奈舛華。讀數(shù)后，打開比色皿暗箱蓋。

7）關(guān)機。實驗完畢，切斷電源，將比色皿取出洗凈，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。


注意事項：

1）為了防止光電管疲勞。不測定時必須將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷，以延長光電管使用壽命。

2）比色皿的使用方法：

①拿比色皿時，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。

②清洗比色皿時，一般先用水沖洗，再用蒸餾水洗凈。如比色皿被有機物沾污，可用鹽酸-乙醇混合洗滌液（1∶2）浸泡片刻，再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化性強的洗滌液洗比色皿，以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿，以免損傷它的透光面。

每次做完實驗時，應(yīng)立即洗凈比色皿。

③比色皿外壁的水用擦鏡紙或細軟的吸水紙吸干，以保護透光面。

④測定有色溶液吸光度時，一定要用有色溶液洗比色皿內(nèi)壁幾次，以免改變有色溶液的濃度。另外，在測定一系列溶液的吸光度時，通常都按由稀到濃的順序測定，以減小測量誤差。

⑤在實際分析工作中，通常根據(jù)溶液濃度的不同，選用液槽厚度不同的比色皿，使溶液的吸光度控制在0.2～0.7。