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閱讀：1478 發(fā)布時(shí)間：2016-8-30

液相色譜柱正確使用方法

一、樣品方面

　　1.除去微粒及雜質(zhì)

　　2.了解樣品在流動(dòng)相中的溶解度

　　如溶樣品的溶劑不是流動(dòng)相，一定要用流動(dòng)相試溶解度，防止其在流動(dòng)相中析出

　　3.了解樣品與色譜柱的基質(zhì)/填料是否有相互作用

　　二、流動(dòng)相方面

　　1.除去微粒

　　純度的要求：超純水，梯度實(shí)驗(yàn)時(shí)水中有機(jī)雜質(zhì)含量要低;緩沖液的PH值，在填料的允許范圍內(nèi);緩沖液(鹽)的濃度;有機(jī)溶劑：色譜純，雜質(zhì)含量盡量低，并與填料相匹配

　　2.流動(dòng)相對(duì)樣品的溶解度

　　有機(jī)溶劑或水的比例

　　三、色譜柱的清洗

　　對(duì)所做的樣品要有充分的了解，用對(duì)該樣品洗脫能力zui強(qiáng)的流動(dòng)相清洗

　　硅膠柱的一般方法是先用甲醇洗去極性雜質(zhì)，然后用干燥的二氯甲烷、正庚烷100~200ml依次活化

　　鍵合相柱(烷基)的一般方法是用20倍體積的甲醇-*仿-甲醇-水依次沖洗

　　(記?。好糠N色譜柱可能性有特定的方法，一定要先看其使用說(shuō)明!)

　　四、色譜柱的存放

　　存放前的處理要除去雜質(zhì)、緩沖鹽

　　合適的存放溶劑

　　避免色譜柱床的干涸

　　避免機(jī)械震動(dòng)

　　防止細(xì)菌生長(zhǎng)

　　注意存放的溫度