小鼠腦啡肽（ENK）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

小鼠腦啡肽(ENK)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍： 96T
18 ng/L - 650 ng/L
使用目的：
本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中腦啡肽(ENK)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠腦啡肽(ENK)水平。用純化的小鼠腦啡肽
(ENK)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入腦啡肽(ENK)，再與
HRP 標記的腦啡肽(ENK)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底
物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。
顏色的深淺和樣品中的腦啡肽(ENK)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD
值），通過標準曲線計算樣品中小鼠腦啡肽(ENK)濃度。
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 標準品（1200ng/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
600 ng/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液
300 ng/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
150 ng/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
75ng/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
37.5 ng/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，
然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡