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GIBCO中文版細(xì)胞培養(yǎng)手冊
細(xì)胞培養(yǎng)簡介 . 2
什么是細(xì)胞培養(yǎng)? . 2
有限細(xì)胞系與連續(xù)細(xì)胞系 . 2
培養(yǎng)條件2
凍存 2
培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài) 3
細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用 3
細(xì)胞培養(yǎng)實驗室 4
安全 4
生物安全性等級 4
安全數(shù)據(jù)表 5
安全設(shè)備 5
個人防護設(shè)備 (PPE) . 5
實驗室安全規(guī)范 5
細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備 . 6
基本設(shè)備 6
擴增設(shè)備 6
其他用品. 6
細(xì)胞培養(yǎng)實驗室 . 7
無菌工作區(qū)域 . 7
細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥 7
細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥布局 . 8
培養(yǎng)箱 . 9
儲存 9
低溫儲存 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .10
細(xì)胞計數(shù)器 10
無菌技術(shù) 11
簡介 11
無菌工作區(qū)域 . 11
良好的個人衛(wèi)生 11
無菌試劑和培養(yǎng)基 . 12
無菌操作12
無菌技術(shù)核對表 . 13
ii | 細(xì)胞培養(yǎng)基本知識
目錄
生物污染 14
簡介 14
細(xì)菌 . 14
酵母 15
霉菌 15
病毒 16
支原體 . 16
交叉污染 .17
抗生素的使用 . 17
細(xì)胞培養(yǎng)基本知識 18
細(xì)胞系 18
選擇合適的細(xì)胞系 . 18
獲取細(xì)胞系 18
培養(yǎng)環(huán)境 19
貼壁培養(yǎng)與懸浮培養(yǎng) . 19
培養(yǎng)基 . 20
pH 值 . 21
二氧化碳 .21
溫度 21
細(xì)胞形態(tài) 22
哺乳動物細(xì)胞 . 22
哺乳動物細(xì)胞形態(tài)差異 22
293 細(xì)胞的形態(tài) . 23
昆蟲細(xì)胞 24
Sf21 細(xì)胞的形態(tài) 24
Sf9 細(xì)胞的形態(tài) 25
方法 26
細(xì)胞培養(yǎng)維持指導(dǎo)原則 26
什么是傳代? . 26
何時傳代? 27
常用細(xì)胞系推薦使用培養(yǎng)基 28
貼壁細(xì)胞的解離 30
TrypLE. 解離酶 30
貼壁細(xì)胞的傳代 . 31
所需材料 31
貼壁細(xì)胞傳代流程 . 31
貼壁昆蟲細(xì)胞傳代的注意事項 32
細(xì)胞培養(yǎng)基本知識 | iii
目錄
懸浮細(xì)胞的傳代 . 33
懸浮細(xì)胞的傳代 33
懸浮培養(yǎng)容器 . 33
所需材料 34
懸浮細(xì)胞傳代流程 . 34
懸浮昆蟲細(xì)胞傳代的注意事項 36
細(xì)胞的冷凍 . 37
凍存 37
細(xì)胞凍存指導(dǎo)原則 . 37
凍存培養(yǎng)基 38
所需材料 38
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案 . 39
冷凍細(xì)胞的解凍 . 40
細(xì)胞解凍指導(dǎo)原則 . 40
所需材料40
冷凍細(xì)胞解凍方案 . 40
支持技術(shù)方案 . 41
利用血球計數(shù)器進行細(xì)胞計數(shù) 41
臺盼藍拒染法 . 42
濃縮細(xì)胞42
附錄 43
疑難解析 43
細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品 . 44
細(xì)胞系 . 44
哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)基 . 45
昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基 46
細(xì)胞培養(yǎng)用血清產(chǎn)品 . 46
細(xì)胞培養(yǎng)用實驗試劑 . 47
抗生素和抗真菌劑 . 48
細(xì)胞培養(yǎng)用輔助產(chǎn)品 . 49
生長因子和純化蛋白 . 49
轉(zhuǎn)染和選擇 50
轉(zhuǎn)染試劑 51
其他資源 52
哺乳動物細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞培養(yǎng) 52
細(xì)胞與組織分析 52
轉(zhuǎn)染選擇工具 . 52
安全數(shù)據(jù)表 52
分析證書 52
53
iv | 細(xì)胞培
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