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產(chǎn)品型號
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海
更新時間:2020-08-31 16:33:06瀏覽次數(shù):900次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)純度 | 99.9 | 供貨周期 | 一周 |
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規(guī)格 | 1*10 6 | 貨號 | XYH1365 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè) | 主要用途 | 該細胞株是源自成年中國倉鼠卵巢深入活體組織切片的CHO細胞的亞克隆。在本庫通過支 |
CHO-K1 中國倉鼠卵巢細胞(懸浮細胞)
細胞名稱
CHO-K1倉鼠卵巢細胞亞株
細胞描述
該細胞株是源自成年中國倉鼠卵巢深入活體組織切片的CHO細胞的亞克隆。在本庫通過支原體檢測。
動物種別:中國倉鼠
性別:雌
組織來源:卵巢
形態(tài):上皮細胞
細胞馴化前的培養(yǎng)基的培養(yǎng)條件
F12K培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度。
供應(yīng)限制:僅供研究之用。
細胞株馴化:
復(fù)蘇CHO-K1細胞轉(zhuǎn)入T25 cm2細胞培養(yǎng)瓶,以F12K基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加10%血清培養(yǎng),待細胞長滿單層后,加入 0.25 % 胰蛋白酶消化,傳代至裝有*培養(yǎng)基的T25 cm2細胞培養(yǎng)瓶(Corning)中繼續(xù)培養(yǎng),當(dāng)細胞鋪滿瓶底時,即得貼壁 CHO-K1 細胞。取貼壁CHO-K1 細胞,換液,加入15 mL含血清的*基和 15 mL無血清CHO-K1培養(yǎng)基,2天后吸出一半培養(yǎng)液,加入等量的無血清CHO-K1,每2天重復(fù)一次此操作,直到胎牛血清濃度低于 1 %后,以基礎(chǔ)培養(yǎng)基B001 繼續(xù)培養(yǎng),即培養(yǎng)基中血清濃度依次以 5 %,2 .5 %,1.25%,0.625 %,0 %降低。細胞在無血清CHO-K1培養(yǎng)基中密度達到5 ×106cells/ mL時,即得懸浮 CHO-K1 細胞。培養(yǎng)條件:37℃,5 % CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細胞方式
(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;
(2)存活細胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
(3)收到細胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。
細胞用途:僅供科研使用。
CHO-K1 中國倉鼠卵巢細胞(懸浮細胞)細胞接收后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2) 在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)時,在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,能準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B(tài)請在10X和20×物鏡下,同時給剛收到的細胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3) 觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。
4) 貼壁細胞:在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長,可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。
5) 懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基)。
6)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備:CHO GROW CD2 培養(yǎng)基 98 %
GlutaMAX-1谷氨酰胺 1%
P/S青霉素-鏈霉素 1%
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90% CHO-K1培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注:次傳代推薦傳代比例為1:2,以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。
下面T25瓶為類;
1,細胞凍存時,取上清,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min ,1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
聲明:細胞產(chǎn)品僅供科學(xué)研究之用,嚴禁轉(zhuǎn)售、共享、分發(fā)、出借、贈送給任何第三方
關(guān)于細胞售后服務(wù)
1、收到細胞24小時內(nèi)出現(xiàn)細菌、真菌、霉菌污染,72小時檢測支原體陽性屬于產(chǎn)品質(zhì)量問題,無條件重發(fā);需拍照我司確認,且非客戶人為因素引起。
2、細胞運輸途中受很多不可控因素(強烈震蕩,溫度變化,時間長等)影響,達不到理想生長狀態(tài),收到后麻煩檢測細胞是否漏液,漂浮并且不能恢復(fù)貼壁能力,死亡等狀況,48小時內(nèi)提出并反饋如上情況,本公司為維護客戶利益,承諾給客戶免費補寄一次,但不建議和不提供免費補寄第二次及以上;
3、享有1個月的超長售后期;
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溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。