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DT40 雞淋巴瘤細(xì)胞

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海

更新時間:2020-08-31 15:51:31瀏覽次數(shù):741次

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規(guī)格 1*10 6 貨號 XYH1350
應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè) 主要用途 DT40是來自Hyline SC雞法氏囊淋巴細(xì)胞株經(jīng)鳥類白血病病毒誘導(dǎo)建株的。原
DT40 雞淋巴瘤細(xì)胞是來自Hyline SC雞法氏囊淋巴細(xì)胞株經(jīng)鳥類白血病病毒誘導(dǎo)建株的。原始淋巴瘤用羅氏相關(guān)病毒1(RAV-1)感染出生1天的小雞得到。法氏囊中生成的腫瘤制成細(xì)胞懸液后通過靜脈注射輸入同基因型的受體小雞。經(jīng)過一次體內(nèi)移植后,建立了DT40細(xì)胞株。 這株細(xì)胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游,表達(dá)的c-myc RNA水平較高。

DT40 雞淋巴瘤細(xì)胞

細(xì)胞介紹

DT40是來自Hyline SC雞法氏囊淋巴細(xì)胞株經(jīng)鳥類白血病病毒誘導(dǎo)建株的。原始淋巴瘤用羅氏相關(guān)病毒1(RAV-1)感染出生1天的小雞得到。法氏囊中生成的腫瘤制成細(xì)胞懸液后通過靜脈注射輸入同基因型的受體小雞。經(jīng)過一次體內(nèi)移植后,建立了DT40細(xì)胞株。 這株細(xì)胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游,表達(dá)的c-myc RNA水平較高。它缺少一個正常c-myc基因,但含有兩個拷貝ALV去調(diào)控的myc基因。

這株細(xì)胞保留了重排免疫球蛋白輕鏈基因(IgL)的能力。 在IgL位點,DT40包含一個重排和一個胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在DT40細(xì)胞株中都能誘導(dǎo)組織相容性(MHC)II類抗原表達(dá)。v-rel 誘導(dǎo)的MHCII表達(dá)比c-rel誘導(dǎo)快,且其有效性在數(shù)周后達(dá)到c-rel的50倍。這株細(xì)胞呈淋巴母細(xì)胞表型。傳染性檢測表明DT40釋放低水平的傳染性RAV-1。這株細(xì)胞可以用于穩(wěn)轉(zhuǎn)研究。

細(xì)胞特性

1) 來源:法氏囊,淋巴瘤

2) 形態(tài):淋巴母細(xì)胞,懸浮

3) 含量:>1x106

4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

DT40 雞淋巴瘤細(xì)胞可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式

(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;

(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

(3)收到細(xì)胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。

細(xì)胞用途:僅供科研使用。

細(xì)胞接收后的處理:

1) 收到細(xì)胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2) 在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)時,在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度??醇?xì)胞的形態(tài)請在10X和20×物鏡下,同時給剛收到的細(xì)胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細(xì)胞需要售后時提供收到細(xì)胞時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3) 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。

4) 貼壁細(xì)胞:在運輸過程中貼壁細(xì)胞會有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長,可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。

5) 懸浮細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基)。

6)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備DMEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                 84%

     特級胎牛血清                  10 %

     雞血清                         5 %

     β-巰基乙醇                 0.05mM

     P/S青霉素-鏈霉素            1%

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細(xì)胞處理

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 收到細(xì)胞后*傳代推薦將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:5的比例進(jìn)行。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。

下面T25瓶為類;

1,細(xì)胞凍存時,取上清,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2,4min ,1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。

3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

聲明:細(xì)胞產(chǎn)品僅供科學(xué)研究之用,嚴(yán)禁轉(zhuǎn)售、共享、分發(fā)、出借、贈送給任何第三方

關(guān)于細(xì)胞售后服務(wù)

1、收到細(xì)胞24小時內(nèi)出現(xiàn)細(xì)菌、真菌、霉菌污染,72小時檢測支原體陽性屬于產(chǎn)品質(zhì)量問題,無條件重發(fā);需拍照我司確認(rèn),且非客戶人為因素引起。

2、細(xì)胞運輸途中受很多不可控因素(強(qiáng)烈震蕩,溫度變化,時間長等)影響,達(dá)不到理想生長狀態(tài),收到后麻煩檢測細(xì)胞是否漏液,漂浮并且不能恢復(fù)貼壁能力,死亡等狀況,48小時內(nèi)提出并反饋如上情況,本公司為維護(hù)客戶利益,承諾給客戶免費補(bǔ)寄一次,但不建議和不提供免費補(bǔ)寄第二次及以上;

3、享有1個月的超長售后期;

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