上海信裕生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

15221858802

當(dāng)前位置:上海信裕生物科技有限公司>>細(xì)胞系>>其它細(xì)胞系>> MNSAH/DF-1 雞胚胎成纖維細(xì)胞

MNSAH/DF-1 雞胚胎成纖維細(xì)胞

參   考   價(jià): 1700

訂  貨  量: ≥1  件

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠(chǎng)商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海

更新時(shí)間:2020-08-31 15:53:10瀏覽次數(shù):883次

聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)
同類(lèi)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品更多>
純度 99.9 供貨周期 一周
規(guī)格 1*10 6 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)
主要用途 該細(xì)胞是起源于10日齡的ELL-0雞蛋的雞細(xì)胞株,自發(fā)永生化。分離原代雞胚成纖維
UMNSAH/DF-1 雞胚胎成纖維細(xì)胞是起源于10日齡的ELL-0雞蛋的雞細(xì)胞株,自發(fā)永生化。分離原代雞胚成纖維細(xì)胞并在培養(yǎng)液中培養(yǎng);傳代直到衰老;在衰老過(guò)程中離心以保持細(xì)胞培養(yǎng)在30%到60%滿(mǎn);不衰老的克隆進(jìn)行鑒定并傳代不少于30次。在軟瓊脂上沒(méi)有觀(guān)察到克隆增殖,說(shuō)明這些細(xì)胞是永生化而沒(méi)有轉(zhuǎn)化。該細(xì)胞可作為病毒增殖、重組蛋白表達(dá)和重組病毒生產(chǎn)的基質(zhì)。

UMNSAH/DF-1 雞胚胎成纖維細(xì)胞

細(xì)胞介紹

該細(xì)胞是起源于10日齡的ELL-0雞蛋的雞細(xì)胞株,自發(fā)永生化。分離原代雞胚成纖維細(xì)胞并在培養(yǎng)液中培養(yǎng);傳代直到衰老;在衰老過(guò)程中離心以保持細(xì)胞培養(yǎng)在30%到60%滿(mǎn);不衰老的克隆進(jìn)行鑒定并傳代不少于30次。在軟瓊脂上沒(méi)有觀(guān)察到克隆增殖,說(shuō)明這些細(xì)胞是永生化而沒(méi)有轉(zhuǎn)化。該細(xì)胞可作為病毒增殖、重組蛋白表達(dá)和重組病毒生產(chǎn)的基質(zhì)。

細(xì)胞特性

1) 來(lái)源:雞胚

2) 形態(tài):成纖維細(xì)胞,貼壁生長(zhǎng)

3) 含量:>1x106

4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性

5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

運(yùn)輸和保存

可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式

(1)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;

(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長(zhǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

(3)收到細(xì)胞后請(qǐng)拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請(qǐng)及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。

UMNSAH/DF-1 雞胚胎成纖維細(xì)胞細(xì)胞接收后的處理:

1) 收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2) 在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)時(shí),在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度??醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X和20×物鏡下,同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀(guān)照片一張留存,作為細(xì)胞需要售后時(shí)提供收到細(xì)胞時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3) 觀(guān)察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。

4) 貼壁細(xì)胞:在運(yùn)輸過(guò)程中貼壁細(xì)胞會(huì)有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長(zhǎng),可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。

5) 懸浮細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基)。

6)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。

細(xì)胞用途:僅供科研使用。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗 1%;

細(xì)胞凍存后復(fù)蘇存活率只有50%左右,建議加大凍存密度。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:39℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細(xì)胞處理:

1,復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。

2,細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于39℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。

3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注:次傳代推薦傳代比例為1:2,以后傳代比例可根據(jù)客戶(hù)需要自己決定。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。

下面T25瓶為類(lèi);

1,細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml*培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

聲明:細(xì)胞產(chǎn)品僅供科學(xué)研究之用,嚴(yán)禁轉(zhuǎn)售、共享、分發(fā)、出借、贈(zèng)送給任何第三方

關(guān)于細(xì)胞售后服務(wù)

1、收到細(xì)胞24小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)細(xì)菌、真菌、霉菌污染,72小時(shí)檢測(cè)支原體陽(yáng)性屬于產(chǎn)品質(zhì)量問(wèn)題,無(wú)條件重發(fā);需拍照我司確認(rèn),且非客戶(hù)人為因素引起。

2、細(xì)胞運(yùn)輸途中受很多不可控因素(強(qiáng)烈震蕩,溫度變化,時(shí)間長(zhǎng)等)影響,達(dá)不到理想生長(zhǎng)狀態(tài),收到后麻煩檢測(cè)細(xì)胞是否漏液,漂浮并且不能恢復(fù)貼壁能力,死亡等狀況,48小時(shí)內(nèi)提出并反饋如上情況,本公司為維護(hù)客戶(hù)利益,承諾給客戶(hù)免費(fèi)補(bǔ)寄一次,但不建議和不提供免費(fèi)補(bǔ)寄第二次及以上;

3、享有1個(gè)月的超長(zhǎng)售后期;

會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
撥打電話(huà)
在線(xiàn)留言