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當前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次腺伴隨病毒PCR試劑盒
產(chǎn)品型號50次
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海
更新時間:2020-07-20 16:33:44瀏覽次數(shù):575次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | XY-0025 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè) |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。 |
腺伴隨病毒PCR試劑盒
Adeno-associated Virus(AAV)
產(chǎn)品及特點
腺伴隨病毒(adeno associated virus,AAV)屬細小病毒科,病毒顆粒 直徑為 20nm,無包膜,20 面體,為目前動物病毒中簡單的一類單鏈線狀 DNA 病毒。人群中,AAV 感染率很高,85%的人呈血清抗體陽性,但是未發(fā) 現(xiàn) AAV 引起人體疾病,甚至早年的流行病學研究報告認為,AAV 感染者減少 了患癌的危險性。因此快速靈敏檢測腺伴隨病毒具有重要意義。本產(chǎn)品就是為 此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒,它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增腺伴隨病毒,與其他病毒沒有交叉 反應(yīng)。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
腺伴隨病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號 | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | PCR MagicMix 3.0 | 1mL(紅蓋) |
試劑二 | 超純水 | 1 mL(亮黃色) |
試劑三 | 腺伴隨病毒 PCR 引物混合物 | 100 μL(白蓋) |
試劑四 | 腺伴隨病毒 PCR 陽性對照 (1×10E8 拷貝/μL) | 50 μL(紅蓋) |
試劑五 | 天凈沙核酸釋放劑試用裝 | 20 次(1mL,綠蓋) |
試劑六 | 使用手冊 | 1 份 |
運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其 他試劑。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼容。本試劑盒免費贈送 20 次天凈沙核酸釋放劑試用裝
2. 如果有 N 個樣品,則需要做 N+2 個提取,包括一個樣品制備陽性對照和 一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要 求的樣品起始量)中加 10μL 腺伴隨病毒 PCR 陽性對照的 1 萬倍稀釋液 而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。 二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系)
3. 對 N+2 個樣品,在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照,故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分:
成分 | 樣品管 N+2 個 | PCR 陰性 對照管 | 標準曲線 樣品管(2-7 管) |
PCR MagicMix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20 μL |
腺伴隨病毒 PCR 引物混 合液 | 各 20μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 個待測樣品 DNA 模板 | 各 |
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PCR 陰性對照(水) | 18 μL | ||
PCR 陽性對照(腺伴隨病 毒 PCR 陽性對照的 1 萬 倍稀釋液) |
|
| 18 μL |
4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng):
過程 | 溫度 | 時間 |
預(yù)變性 | 95℃ | 5min |
PCR 反應(yīng) (35個循環(huán)) | 95℃ | 15 sec |
72℃ | 60 sec | |
55℃ | 15 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、電泳檢測
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 136bp。陽性對照必須有此條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴 增,否則實驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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