氣單胞菌通用PCR試劑盒 返回列表頁

氣單胞菌通用PCR試劑盒

Aeromonas spp

產(chǎn)品及特點(diǎn)

氣單胞菌屬（Aeromonas spp.）屬于氣單胞菌科，廣泛分布于自然界， 可從水源、土壤以及人的糞便中分離，引起的疾病廣泛存在于哺乳動物（如人、 鳥類等）和冷血動物（如鮭、魚、蛇等）中。在人類主要引起腸內(nèi)感染和腸外 感染，前者主要表現(xiàn)為胃腸炎，患者通常呈癥狀較輕的水樣腹瀉，癥狀嚴(yán)重， 呈血性糞便且便中有大量白細(xì)胞者（和志賀菌引起的痢疾很相似）較少見，本 菌是夏季腹瀉的常見病原菌之一，主要致病物質(zhì)為溶血毒素和細(xì)胞毒素；后者 包括敗血癥、傷口、眼、關(guān)節(jié)、腹腔內(nèi)及其他感染，主要與外傷后傷口接觸了 污染的水有關(guān)。因此快速靈敏檢測氣單胞菌具有重要的意義，本試劑盒就是為 此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供細(xì)菌 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增氣單胞菌 DNA，跟其他微生物無交 叉反應(yīng)。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研。 

氣單胞菌通用PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設(shè)置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 陽性對照的 100 倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作 為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)細(xì)菌 DNA 提取試 劑盒兼容。也可以選購本公司的細(xì)菌 DNAout 或柱式細(xì)菌 DNAout。本試 劑盒免費(fèi)贈送 20 次免 DNA 提取的天凈沙核酸釋放劑，本產(chǎn)品的裂解液可 以直接作為 PCR 模板，省略了 DNA 提取步驟。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40 μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 471bp。陽性對照必須有此條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴(kuò) 增，否則實(shí)驗(yàn)無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。