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當前位置：上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次非洲豬瘟病毒PCR試劑盒
| 供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | XY-0037 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),農業(yè) |
| 主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。 |
非洲豬瘟病毒PCR試劑盒
African Swine Fever Virus(ASFV)
產品及特點
非洲豬瘟病毒(African swine fever, ASF)是由非洲豬瘟病毒病毒(African swine fever virus, ASFV)引起豬的一種急性、熱性、高度接觸傳染性疾病，病 死率高達 100%，是我國一類動物疫病和世界動物衛(wèi)生組織規(guī)定的必須報告的 動物疫病，受到世界各國的高度重視。因此 ASFV 的快速準確鑒定，對該病的 預防和檢疫有著重要作用，為此本公司開發(fā)了 ASFV 的 PCR 檢測試劑盒，它 具有下列特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增非洲豬瘟病毒，與其他病原沒有交 叉反應。
3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
非洲豬瘟病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號 | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（紅蓋） |
試劑二 | 超純水 | 1 mL（亮黃色） |
試劑三 | 非洲豬瘟病毒 PCR 引物混合液 | 100 μL（白蓋） |
試劑四 | 非洲豬瘟病毒 PCR 陽性對照 （1×10E8 拷貝/μL） | 50 μL（黃蓋） |
試劑五 | 使用手冊 | 1 份 |
運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。
2. 如果有 N 個樣品，則需要做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一 個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 非洲豬瘟病毒 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液 而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后后得到模板 DNA 放冰 上待用。
二、設置 PCR 反應（40μL 體系） 3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分：
成分 | 樣品管 N+2 個 | PCR 陰性 對照管 | 標PCR 陽性 對照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μLL |
非洲豬瘟病毒 PCR 引物 混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 個制備的 RNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 陰性對照（水） |
| 18 μL |
|
| PCR 陽性對照（非洲豬瘟 病毒 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液） | 18 μL |
4. 按下表設置 PCR 反應：
過程 | 溫度 | 時間 |
預變性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反應 （35個循環(huán)） | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
72℃ | 40 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 7 min |
三、電泳檢測 5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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