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煙曲霉PCR試劑盒

Aspergillus fumigatus

產(chǎn)品及特點(diǎn)

煙曲霉(Aspergillus fumigatus.)屬殼霉目、杯霉科、煙曲霉屬，是一種重 要的致病菌，也是引起食品的一種真菌。煙曲霉的菌落生長(zhǎng)迅速，絨狀或 作一定的絮狀，暗煙綠色，老后色變得更深。此菌嗜高溫，在 45℃或更高的溫 度下生長(zhǎng)茂盛。在糧食發(fā)熱霉變的中期和后期常大量出現(xiàn)，促進(jìn)糧溫的升高和 敗壞。煙曲霉能寄生在人、鳥類及其它脊椎動(dòng)物的肺部引起結(jié)核癥。也能侵染 棉鈴和蘋果等，引起果實(shí)腐爛，或寄藏于種子上。因此快速檢測(cè)煙曲霉具有重 要意義。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的產(chǎn)品，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供細(xì)菌 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增氣單胞菌 DNA，跟其他微生物無交 叉反應(yīng)。

3. 提供陽性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研。 

煙曲霉PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽 性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?10μL 陽性對(duì)照的 100 倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作 為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)細(xì)菌 DNA 提取試 劑盒兼容。也可以選購(gòu)本公司的細(xì)菌 DNAout 或柱式細(xì)菌 DNAout。本試 劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 20 次免 DNA 提取的天凈沙核酸釋放劑，本產(chǎn)品的裂解液可 以直接作為 PCR 模板，省略了 DNA 提取步驟。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40 μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 471bp。陽性對(duì)照必須有此條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò) 增，否則實(shí)驗(yàn)無效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。