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當前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次曲霉屬通用PCR試劑盒
產(chǎn)品型號50次
品 牌其他品牌
廠商性質生產(chǎn)商
所 在 地上海
更新時間:2020-07-22 15:49:41瀏覽次數(shù):440次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | XY-0057 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè) |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。 |
曲霉屬通用PCR試劑盒
Aspergillus spp.
產(chǎn)品及特點
曲霉屬,曲霉目中的一屬,包括米曲霉、黑曲霉等。一方面有很多菌種可 被用于各種有益物質的生產(chǎn),如用于蛋白消化劑的蛋白酶(醬油曲霉)、檸檬 酸(黑曲霉)、衣康酸(土曲霉、解烏頭酸曲霉)以及曲酸(黃曲霉)等。但另 一方面,也有不少侵害家禽、家畜甚至人體內臟特別是呼吸器官的病菌,如引 起曲霉癥的煙曲霉等。因此快速靈敏檢測曲霉屬具有重要意義。本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開發(fā)的曲霉屬通用檢測試劑盒,它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增曲霉屬,與其他病原沒有交叉反應。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
曲霉屬通用PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號 | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | PCR Magic Mix 3.0 | 1 mL(紅蓋) |
試劑二 | 超純水 | 1 mL(亮黃蓋) |
試劑三 | 曲霉屬通用 PCR 引物混合液 | 100 μL(白蓋) |
試劑四 | 曲霉屬通用 PCR 陽性對照 (1×10E8 拷貝/μL) | 50 μL(黃蓋) |
試劑五 | 使用手冊 | 1 份 |
運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其 他試劑。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。
2. 如果有 N 個樣品,則需要做 N+2 個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一 個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求 的樣品起始量)中加 10μL 曲霉屬通用 PCR 陽性對照的 100 倍稀釋液而 得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后后得到模板 DNA 放冰上 待用。
二、設置 PCR 反應(40 μL 體系)
3. 對 N+2 個樣品,在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照,故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分:
成分 | 樣品管 N+2 個 | PCR 陰性 對照管 | PCR 陽性 對照管 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
曲霉屬通用 PCR 引物混 合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 個樣品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 陰性對照(超純水) |
| 18 μL |
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PCR 陽性對照(煙曲霉 PCR 陽性對 照的 10000 倍稀釋液) | 18 μL |
4. 按下表設置 PCR 反應
過程 | 溫度 | 時間 |
預變性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反應 (35個循環(huán)) | 95℃ | 30 sec |
58℃ | 30 sec | |
72℃ | 20 sec | |
后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、電泳檢測
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴增結束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 471bp。陽性對照必須有此條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴 增,否則實驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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