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供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | XY-0098 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),農業(yè) |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。 |
蠟樣芽胞桿菌PCR試劑盒
Bacillus cereus
產品及特點
蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus),又稱仙人掌桿菌,是一種革蘭氏陽性 菌,β溶血性的桿狀細菌。蠟樣芽孢桿菌是兼性厭氧性。經常在土壤和食物中被 發(fā)現(xiàn),有些菌株會引起食物中毒,例如"炒飯綜合癥";另外一些菌株則對其他 動物有益,可產生抗菌物質,抑制有害微生物的繁殖,降解土壤中的營養(yǎng)成分, 改善生態(tài)環(huán)境??僧a生細菌蛋白酶;可用于麻脫膠,是各種抗生素抗菌活性的 測定菌。可用于明膠液化,牛奶胨化,還原硝酸鹽,水解淀粉。因此快速靈敏 檢測蠟樣芽胞桿菌具有重要意義。本產品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試 劑盒,它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增蠟樣芽胞桿菌,與其他微生物沒有 交叉反應。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
蠟樣芽胞桿菌PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號 | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(紅蓋) |
試劑二 | 超純水 | 1 mL(亮黃色) |
試劑三 | 蠟樣芽胞桿菌PCR 引物混合液 | 100 μL(白蓋) |
試劑四 | 蠟樣芽胞桿菌 PCR 陽性對照(1 ×10E8 拷貝/μL) | 50 μL(黃蓋))
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試劑五 | 天凈沙核酸釋放劑(試用裝) | 20 次(1 mL,綠 蓋) |
試劑六 | 使用手冊 | 1 份 |
運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其 他試劑。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。
2. 如果有 N 個樣品,則需要做 N+2 個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一 個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求 的樣品起始量)中加 10μL 蠟狀芽孢桿菌 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋 液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。
二、設置 PCR 反應(40μL 體系)
3. 對 N+2 個樣品,在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照,故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分:
成分 | 樣品管 N+2 個 | PCR 陰性 對照管 | PCR 陽性 對照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μLL |
蠟樣芽胞桿菌PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 個樣品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 陰性對照(水) |
| 18 μL |
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PCR 陽性對照(蠟樣芽胞桿菌 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋液) | 18 μL |
4. 按下表設置 PCR 反應:
過程 | 溫度 | 時間 |
預變性 | 95℃ | 5 min |
PCR反應 (35個循環(huán)) | 95℃ | 30 sec |
57℃ | 15 sec | |
72℃ | 40 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、電泳檢測
5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴增,否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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