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牛皰疹病毒1型PCR試劑盒

Bovine Hepervirus 1 (BHV-1)

產(chǎn)品及特點

牛皰疹病毒 1 型（Bovine herpesvirus 1，BoHV-1）引起牛的傳染性鼻 氣管炎，又稱壞死性鼻炎、紅鼻病，表現(xiàn)上呼吸道及氣管黏膜發(fā)炎、呼吸困難、 流鼻汁等癥狀，BHV-1 還可引起生殖道感染、結(jié)膜炎、腦膜腦炎、流產(chǎn)、乳房 炎等多種病癥。該病被 OIE 列為 B 類傳染病，也被我國列為二類動物傳染病， 其易感染性和潛伏性給畜牧業(yè)以及貿(mào)易帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟損失，因此牛皰疹 病毒 1 型的快速準(zhǔn)確鑒定對該病的預(yù)防和檢疫有著重要作用，本產(chǎn)品具有下列 特點： 

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增牛皰疹病毒 1 型 DNA，與其他病毒 沒有交叉反應(yīng)。 

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。 

牛皰疹病毒1型PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。  

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個樣品，則需要做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一 個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 芽孢桿菌通用 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋 液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。