上海信裕生物科技有限公司
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當(dāng)前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次犬冠狀病毒RT-PCR試劑盒

犬冠狀病毒RT-PCR試劑盒

參   考   價(jià): 1990 1790

訂  貨  量: 1-4  件 ≥5  件

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)50次

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海

更新時(shí)間:2020-07-28 15:06:21瀏覽次數(shù):424次

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供貨周期 一周 規(guī)格 50T
貨號(hào) XY-0171 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)
主要用途 熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性。
犬冠狀病毒RT-PCR試劑盒會(huì)引起鮑病毒病,危害的主要對(duì)象是我國(guó) 南方養(yǎng)殖的九孔鮑、雜色鮑,北方地區(qū)養(yǎng)殖的皺紋盤(pán)鮑。該病潛伏期短,發(fā)病急,傳染 性強(qiáng),死亡率高,造成鮑種苗及成鮑的大量死亡,4~30d 內(nèi)死亡率高達(dá) 95%以上,溶 藻膠弧菌和副溶血弧菌可能會(huì)和病毒共同感染鮑并且是鮑病的共同致病因子。

犬冠狀病毒RT-PCR試劑盒

Canine Corona Virus(CCoV)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

犬冠狀病毒(Canine coronavirus,CCV )為單鏈 RNA 病毒,有 6~7 種多 肽,其中 4 種是糖肽,不含 RNA 聚合酶及神經(jīng)氨酸酶??墒谷l(fā)生程度不同的胃 腸炎癥狀,特征有頻繁嘔吐、腹瀉、沉郁、厭食等癥狀。本病一年四季均可發(fā)生, 以冬季多發(fā),病犬是主要的傳染原,犬可通過(guò)呼吸道、消化道、糞便及污染物傳染。 該病一但發(fā)生,同窩犬同室犬很難控制均可造成感染。幼犬死亡率較高,對(duì)幼犬的 危害較大。近的研究發(fā)現(xiàn),CCV 感染的宿主范圍有不斷擴(kuò)大的趨勢(shì),許多野生動(dòng)物 如虎、獅、大熊貓、小熊貓、水紹也可感染。所以對(duì)犬呼吸道病毒的快速準(zhǔn)確檢測(cè) 與鑒定具有重要的臨床意義。本產(chǎn)品根據(jù) RT-PCR 原理開(kāi)發(fā),它具有下列特點(diǎn):

1.一站式,用于不需要單獨(dú)準(zhǔn)備每種成分,包括引物和對(duì)照。
2.根據(jù)牛病毒性腹瀉病毒的保守基因序列設(shè)計(jì)的引物,具有良好的特異性。
3.基于染料法qRT-PCR檢測(cè),靈敏度比常規(guī)RT-PCR高10-100倍,可以達(dá)到至少1000拷貝/反應(yīng)。
4.使用一管式qRT-PCR技術(shù),RT和PCR兩步在一個(gè)試管內(nèi)完成,不需要中間轉(zhuǎn)移樣品,降低了操作誤差和可能的污染。
5.本產(chǎn)品足夠50次30μL體系的RT-PCR,只能用于科研,不能用于臨床。

犬冠狀病毒RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號(hào)

成  份

規(guī)格

試劑一

雙酶一管式 RT-PCR Buffer,2×

750 uL 

試劑二

MMLV-Taq Mix

100 uL

試劑三

CCV 專(zhuān)一性引物對(duì) 

100 uL

試劑四

CCV 陽(yáng)性對(duì)照(10E8 拷貝/uL) 

50 uL

試劑五

超純水 

1 mL

試劑六

使用手冊(cè) 

1 份

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。 

自備試劑 一管式病毒 RNAout 或柱式病毒 RNAout

使用方法 一、樣品 RNA 的制備

用自選方法純化可能含 CCV 樣品的 RNA,也可以另購(gòu)本公司的一管式病毒 RNAout 或柱式病毒 RNAout,上述兩款產(chǎn)品跟本試劑盒兼容。

二、陽(yáng)性對(duì)照

1. 為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì) 照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。

2. 使用本陽(yáng)性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。 在專(zhuān)門(mén)的區(qū)域操作。

三、設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)(30 uL 體系)

3. 在 PCR 管中加入下列成分: 

成分

樣品

陽(yáng)性對(duì)照

陰性對(duì)照

雙酶一管式 RT-PCR Buffer,2×

15 uL

15 uL

15 uL

CCV 專(zhuān)一性引物對(duì) 

引物混合物

2μL

2μL

2μL

樣品 RNA 

1-5 uL

 

 

 CCV 陽(yáng)性對(duì)照 

 

2 uL

 

補(bǔ)超純水到

 28 uL

28 uL

28 uL 

 MMLV-Taq Mix 2 uL  2 uL  2 uL 

4. 輕柔混勻后上機(jī),按下面參數(shù)進(jìn)行 RT-PCR。

過(guò)程

溫度

時(shí)間

逆轉(zhuǎn)錄 

60℃

30 分鐘

預(yù)變性

94℃  

2 分鐘

PCR 反應(yīng) (30 個(gè)循環(huán))

94℃ 

30 s 

49℃  

30 s 

72

30 s 

 延伸  72 5 分鐘

5. 電泳檢測(cè) RT-PCR 產(chǎn)物。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 384bp。 

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