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供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | XY-0248 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),農業(yè) |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。 |
鴨乙型肝炎病毒PCR試劑盒
Duck Hepatitis B Virus(DHBV)
產品及特點
鴨乙型肝炎病毒(Duck Hepatitis B virus、DHBV)屬于禽嗜肝 DNA 病 毒屬( Avihepadnavirus ) , 此 屬 與 以 HBV 為代表的 正 嗜 肝 DNA 病 毒 屬 ( Orthohepadnavirus )同屬于嗜肝 DNA 病毒科 (Hepadnaviridae)。 DHBV 一直作為研究 HBV、篩選和驗證中西藥物抗病 毒活性的動物病毒模型,通過研究 DHBV 感染鴨闡明了嗜肝 DNA 病毒的復 制過程。在此研究中定量檢測 DHBV 具有重要的意義。本產品就是根據(jù) DHBV 保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品,它具有下列特 點:
1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增鴨乙型肝炎病毒,與其他病原沒有 交叉反應。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
鴨乙型肝炎病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號 | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | PCR MagicMix 3. | 1 mL(紅蓋) |
試劑二 | 超純水 | 1 mL(亮黃蓋) |
試劑三 | 鴨乙型肝炎病毒PCR 引物混合液 | 100 μL(白蓋) |
試劑四 | 鴨乙型肝炎病毒 PCR 陽性對照 (1×10E8 拷貝/μL) | 50 μL(黃蓋))
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試劑五 | 使用手冊 | 1 份 |
運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其 他試劑。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。
2. 如果有 N 個樣品,則需要做 N+2 個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一 個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求 的樣品起始量)中加 10μL 芽孢桿菌通用 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋 液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。
二、設置 PCR 反應(40μL 體系)
3. 對 N+2 個樣品,在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照,故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分:
成分 | N+2個 樣品管 | PCR陰性對照 | PCR陽性對照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
鴨乙型肝炎病毒PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 個樣品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 陰性對照(水) |
| 18 μL | - |
PCR 陽性對照(鴨乙型肝炎病毒 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋液) | - |
| 18 μL |
4. 按下表設置 PCR 反應:
過程 | 溫度 | 時間 |
預變性 | 95℃ | 5 min |
PCR反應 (35個循環(huán)) | 95℃ | 30 sec |
54℃ | 30 sec | |
72℃ | 20 sec | |
后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、電泳檢測
5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴增,否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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