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鏈球菌B組PCR試劑盒

Group B Streptococcus spp.(GBS) 

產(chǎn)品及特點(diǎn)

鏈球菌B組(Group B Streptococcus spp, GBS)能引起牛乳房炎，嚴(yán)重危害畜牧業(yè)，因此早期被畜醫(yī)界重視。經(jīng)過幾十年的研究，發(fā)現(xiàn)鏈球菌B組還可引起新生兒敗血癥、肺炎、腦膜炎，甚至死亡。在感染后存活的新生兒，還有可能有嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，包括腦積水、智力障礙、小頭畸形、耳聾等。同時(shí)，鏈球菌B組還可引起孕婦感染、引起早產(chǎn)、胎兒發(fā)育不良（低體重兒）、胎膜早破及晚期流產(chǎn)，因此快速檢測(cè)鏈球菌B組具有重要意義。本試劑盒根據(jù)熒光定量PCR原理開發(fā)，它具有下列特點(diǎn)：

1.即開即用，用戶只需要提供細(xì)菌DNA模板。
2.引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增鏈球菌B組。
3.提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4.PCR mix中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。
5.本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次。
6.本產(chǎn)品只能用于科研。

鏈球菌B組PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽(yáng) 性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?10μL 陽(yáng)性對(duì)照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。