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當(dāng)前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次人副流感病毒2型RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品型號(hào)50次
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海
更新時(shí)間:2020-08-03 15:53:21瀏覽次數(shù):380次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號(hào) | XY-0406 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè) |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性。 |
人副流感病毒2型RT-PCR試劑盒
Human Parainfluenza Virus 2(HPIV-2)
產(chǎn)品及特點(diǎn)
人副流感病毒(Human Parainfluenza Virus,HPIV)常常引起兒童下呼 吸道感染的一種病毒,其致病性僅次于呼吸道合胞病毒 (RSV)。與 RSV 一樣, 人類副流感病毒可以造成反復(fù)發(fā)作的上呼吸道感染(如感冒和喉嚨痛)。它也能 造成嚴(yán)重的反復(fù)感染的下呼吸道疾?。ㄈ绶窝?,支氣管炎和細(xì)支氣管炎),特別 是在老年人中和有免疫缺陷人群中。人類副流感病毒的四種亞型各有不同的臨床 和流行病學(xué)特征。I 型和 II 型的典型的臨床特征是造成兒童喉氣管支氣管炎, I 型是這種兒童喉氣管支氣管炎的主要原因,而 II 型次之。I 型和 II 型均能造 成其它的上呼吸道和下呼吸道疾病。本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開發(fā)的人副流感病毒 2 型檢測(cè)的試劑盒。它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式,用于不需要單獨(dú)準(zhǔn)備每種成分,包括引物和對(duì)照。
2. 根據(jù)人副流感病毒 2 型的保守基因序列設(shè)計(jì)的引物,具有良好的特異性。
3. 靈敏度可以達(dá)到 1000 拷貝/反應(yīng)。
4. 使用一管式 RT-PCR 技術(shù),RT 和 PCR 兩步在一個(gè)試管內(nèi)完成,不需要中間 轉(zhuǎn)移樣品,降低了操作誤差和可能的污染。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研,不能用于臨床。
人副流感病毒2型RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號(hào) | 成 份 | 規(guī)格 |
試劑一 | 5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer | 200 μL(橘黃蓋) |
試劑二 | MMLV-Taq Mix | 75 μL(紅蓋) |
試劑三 | 超純水 | 1 mL(亮黃蓋) |
試劑四 | 人副流感病毒 2 型 RT-PCR 引物混合液 | 100 μL(白蓋) |
試劑五 | 人副流感病毒 2 型 RT-PCR 陽(yáng)性對(duì)照(1×10E8 拷貝/μL) | 50 μL(黃蓋) |
試劑六 | 使用手冊(cè) | 1 份 |
運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為 12 個(gè)月。收到貨后陽(yáng)性對(duì)照需要跟其他成分 分開放置,因?yàn)槠淙菀孜廴酒渌煞?,造成假?yáng)性。
自備試劑 樣品 RNA
使用方法 一、樣品 RNA 的制備
1. 如果有 N 個(gè)樣品,必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取,多出的一個(gè)是 PC(樣品制備陽(yáng)性 對(duì)照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?10μL 流行性出血熱病毒 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 100 倍稀釋作為制備的陽(yáng)性對(duì)照;用水作為制備的陰性對(duì)照。 制備所得成為樣品 RNA。
2. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 RNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 RNA 提 取試劑盒兼容。
二、設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系)
3. 如果有 N+2 個(gè)樣品,則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管(額外增加的兩個(gè)管一個(gè)是 RT-PCR 陽(yáng)性對(duì)照,另一個(gè)是 RT-PCR 陰性對(duì)照)并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分:
成分 | 樣品 | 陽(yáng)性對(duì)照 | 陰性對(duì)照 |
5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer | 各 4 μL | 4 μL | 4 μL |
人副流感病毒 2 型 RT-PCR 引物 混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
N+2 個(gè)制備的 RNA 樣品 | 各12.5 μL |
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超純水 |
| 12.5 μL |
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人副流感病毒 2 型 RT-PCR 陽(yáng)性 對(duì)照的 10000 倍稀釋液 | L |
| 12.5 μL |
MMLV-Taq Mix | 1.5 μL | 1.5 μL | 1.5 μL |
4. 上機(jī)進(jìn)行 RT-PCR,RT-PCR 反應(yīng)參數(shù)為:
過程 | 溫度 | 時(shí)間 |
逆轉(zhuǎn)錄 | 42℃ | 30 min |
預(yù)變性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反應(yīng) (35 個(gè)循環(huán)) | 95℃ | 30 sec |
55℃ | 30 sec | |
72℃ | 20 sec | |
延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 瓊脂糖電泳檢測(cè)擴(kuò)增效果。如果陰性對(duì)照有擴(kuò)增產(chǎn)物或陽(yáng)性對(duì)照無(wú)擴(kuò)增產(chǎn)物, 則說(shuō)明實(shí)驗(yàn)失敗,需要分析實(shí)驗(yàn)失敗的原因。只有在陰性對(duì)照沒有擴(kuò)增產(chǎn)物、 陽(yáng)性對(duì)照有 122bp 預(yù)期的擴(kuò)增產(chǎn)物的情況下,才有必要分析樣品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果, 如果有擴(kuò)增產(chǎn)物則為陽(yáng)性,如果無(wú)則為陰性。
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