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供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | XY-0414 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),農業(yè) |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。 |
人類嗜T淋巴細胞病毒1型前病毒PCR試劑盒
Human T-cell Lymphoma Virus Provirus(HTLV-1)
產品及特點
人類嗜 T 淋巴細胞病毒1型(Human T-lymphotropic Virus 1,HTLV-1)是一 種感染后可導致血癌或其他轉移癌的 RNA 病毒,在體內主要感染 CD4+ T 淋巴細胞, 可引起成人 T 淋巴細胞白血病/淋巴瘤、HTLV-Ⅰ相關脊髓?。℉TLV-Ⅰassociated myelopathy,HAM/熱帶痙攣性下肢癱,tropical spastic paraparesis TSP)及色 素層炎(uveitis),主要通過輸血、針頭、性行為、母子傳染。HTLV-I 病毒是愛滋病 毒 (HTLV-I) 的遠親,但 HTLV-I 和愛滋病的發(fā)生沒有任何關連。目前各捐血中心以 酵素免疫法全面篩檢 HTLV-I 病毒。
患者的白血病細胞內有 HTLV 前病毒 DNA 的整合,所以 HTLV-1前病毒 DNA 水 平可以作為病毒載量之外的另一標志物。本產品就是針對此需求而建立的一種檢測 HTLV-1前病毒 DNA 的 PCR 檢測方法,本試劑盒具有下列特點:
1. 根據 HTLV-1 PX 基因設計的針對 HTLV-1 前病毒的 PCR 引物,專一性強。
2. 即開即用,用戶只需要提供樣品模板,操作簡單,定量準確快速。
3. 試劑盒有陽性對照,別于區(qū)分真假陽性。
4. 本試劑盒足夠 50 次 40uL 反應體系的常規(guī) PCR。
5. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
人類嗜T淋巴細胞病毒1型前病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號 | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | PCR MagicMix 3. | 1 mL(紅蓋) |
試劑二 | 超純水 | 1 mL(本色蓋)) |
試劑三 | HTLV-1 前病毒 PCR 引物混合液 | 100 μL(白蓋) |
試劑四 | HTLV-1 前病毒 PCR 陽性對照 | 50 μL(黃蓋))
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試劑五 | 天凈沙 DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(試用裝) |
試劑六 | 使用手冊 | 1 份 |
運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其 他試劑。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 如果有 N 個樣品,必須設置 N+2 個提取,多出的一個是 PC(樣品制備陽 性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此 作為 PC。另外用水作為 NC。
2. 用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。
二、設置 PCR 反應(40μL 體系)
3. 對 N+2 個樣品,在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照,故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分:
成分 | N+2個 樣品管 | PCR陰性對照 | PCR陽性對照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
HTLV-1 前病毒 PCR 引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 個樣品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
超純水 |
| 18 μL | - |
HTLV-1 前病毒 PCR 陽性對照 10000 倍稀釋液 | - |
| 18 μL |
4. 按下列 PCR 參數進行 PCR 擴增:
過程 | 溫度 | 時間 |
預變性 | 94℃ | 4 分鐘 |
PCR 反應 (30 個循環(huán)) | 94℃ | 60 秒 |
50℃ | 30 秒 | |
72℃ | 60 秒 | |
后續(xù)延伸 | 72℃ | 10 分鐘 |
三、電泳檢測
5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴增,否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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