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牛傳染性鼻氣管炎病毒PCR試劑盒

Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus(IBRV)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

牛傳染性鼻氣管炎病毒(Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus, IBRV)會(huì)引起牛傳染性鼻氣管炎病毒，又稱“壞死性鼻炎”、“紅鼻病”，是 一種牛呼吸道接觸性傳染病。臨床表現(xiàn)形式多樣，以呼吸道為主，伴有結(jié)膜炎、 流產(chǎn)、乳腺炎，有時(shí)誘發(fā)小牛腦炎等。毒常常經(jīng)上呼吸道粘膜、生殖道粘膜侵 入，還可經(jīng)眼結(jié)膜上皮和軟殼蜱侵入，是否經(jīng)口腔感染仍未證實(shí)。經(jīng)上呼吸道 入侵的病毒沿粘膜、神經(jīng)纖維、淋巴管擴(kuò)散到鄰近部位引起上呼吸道炎癥、結(jié) 膜炎，對(duì)養(yǎng)殖業(yè)造成較大經(jīng)濟(jì)損失，因此牛傳染性鼻氣管炎病毒的快速準(zhǔn)確鑒 定對(duì)該病的預(yù)防和檢疫有著重要作用。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增牛傳染性鼻氣管炎病毒，與其他病 毒沒有交叉反應(yīng)。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

牛傳染性鼻氣管炎病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽(yáng) 性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?10μL 陽(yáng)性對(duì)照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。