當前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次絲狀支原體絲狀亞種SC型PCR試劑盒
供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | XY-0519 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),農業(yè) |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。 |
絲狀支原體絲狀亞種SC型PCR試劑盒
Mycoplasma mycoides subsp(mycoides SC)
產品及特點
絲狀支原體絲狀亞種 SC 型(Mycoplasma mycoides subsp mycoides SC)只感染牛屬反芻動物,即主要是牛、瘤牛和牦牛,會引起牛傳染性胸膜肺 炎,是一種高度接觸性傳染病,以滲出性纖維素性肺炎和漿液纖維素性胸膜肺 炎為特征。初期病變以小葉性支氣管肺炎為特征。肺炎灶充血、水腫,呈鮮紅 色或紫紅色。中期呈漿液性纖維素性胸膜肺炎,病肺腫大、增重,灰白色,多 為一側性,以右側較多,多發(fā)生在膈葉,也有在心葉或尖葉者。該疾病往往會 給養(yǎng)殖業(yè)帶來較大的經濟損失,因此絲狀支原體絲狀亞種 SC 型的檢測具有重 要的意義。本試劑盒是根據(jù) PCR 原理開發(fā),它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供細菌 DNA 模板。
2. 引物經過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增絲狀支原體絲狀亞種 SC 型。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。
6. 本產品只能用于科研。
絲狀支原體絲狀亞種SC型PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號 | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | PCR MagicMix 3. | 1 mL(紅蓋) |
試劑二 | 超純水 | 1 mL(亮黃蓋) |
試劑三 | 絲狀支原體絲狀亞種 SC 型 PCR 引物混合 液 | 100 μL(白蓋) |
試劑四 | 絲狀支原體絲狀亞種 SC 型 PCR 陽性對照 (1×10E8 拷貝/uL) | 50 μL(黃蓋))
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試劑五 | 天凈沙核酸釋放劑試用裝 | 20 次(1mL,綠蓋) |
試劑六 | 使用手冊 | 1 份 |
運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其 他試劑。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 如果有 N 個樣品,必須設置 N+2 個提取,多出的一個是 PC(樣品制備陽 性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用 10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此 作為 PC。另外用水作為 NC。
2. 用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。
二、設置 PCR 反應(40μL 體系)
3. 對 N+2 個樣品,在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照,故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分:
成分 | N+2個 樣品管 | PCR陰性對照 | PCR陽性對照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
絲狀支原體絲狀亞種 SC 型PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 個樣品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 陰性對照(水) |
| 18 μL | - |
PCR 陽性對照(用絲狀支原 體絲狀亞種SC型PCR陽性 對照的 10000 倍稀釋液) | - |
| 18 μL |
4. 按下表設置 PCR 反應:
過程 | 溫度 | 時間 |
預變性 | 94℃ | 5 min |
PCR反應 (35個循環(huán)) | 94℃ | 15 sec |
55℃ | 15 sec | |
72℃ | 10 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、電泳檢測
5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴增,否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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