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當(dāng)前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次兔巴氏桿菌PCR試劑盒
產(chǎn)品型號50次
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海
更新時間:2020-08-10 15:33:10瀏覽次數(shù):420次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | XY-0553 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè) |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。 |
兔巴氏桿菌PCR試劑盒
Parvovirus B19(PVB19)
產(chǎn)品及特點
兔巴氏桿菌病兔巴氏桿菌病是由多殺性巴氏桿菌引起的,家兔中較常發(fā)生, 一般無季節(jié)性,以冷熱交替、氣溫驟變,悶熱、潮濕多雨季節(jié)發(fā)生較多。病兔 的糞便、分泌物可以不斷排出有毒力的病菌,污染飼料、飲水、用具和外界環(huán) 境,經(jīng)消化道而傳染給健康兔,或由咳嗽、噴嚏排出病菌,通過飛沫經(jīng)呼吸道 而傳染,吸血昆蟲的媒介和皮膚、粘膜的傷口也可發(fā)生傳染。臨診特征是鼻炎、 地方流行性肺炎、全身性敗血癥、中耳炎、結(jié)膜炎、子宮積膿、睪丸炎等不同 病型。此病是引起 9 周齡-6 月齡兔死亡的一種主要的傳染病。本產(chǎn)品就是為 此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒,它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增兔巴氏桿菌,不跟其他病毒發(fā)生 交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研
兔巴氏桿菌PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號 | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(紅蓋) |
試劑二 | 超純水 | 1 mL(亮黃蓋) |
試劑三 | 兔巴氏桿菌PCR 引物混合 液 | 100 μL(白蓋) |
試劑四 | 兔巴氏桿菌PCR 陽性對照 (1×10E8 拷貝/μL) | 50 μL(黃蓋))
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試劑五 | 天凈沙核酸釋放劑(試用裝) | 20 次(1 mL,綠蓋) |
試劑六 | 使用手冊 | 1 份
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運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為 12 個月。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 如果有 N 個樣品,必須設(shè)置 N+2 個提取,多出的一個是 PC(樣品制備陽 性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用 10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此 作為 PC。另外用水作為 NC。
2. 用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系)
3. 對 N+2 個樣品,在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照,故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分:
成分 | N+2個 樣品管 | PCR陰性對照 | PCR陽性對照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
兔巴氏桿菌PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 個樣品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 陰性對照(水) |
| 18 μL | - |
PCR 陽性對照(兔巴氏桿菌 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋液) | - |
| 18 μL |
4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng):
過程 | 溫度 | 時間 |
預(yù)變性 | 95℃ | 5 min |
PCR反應(yīng) (35個循環(huán)) | 95℃ | 30 sec |
55℃ | 30 sec | |
72℃ | 20 sec | |
后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、電泳檢測
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴增,否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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