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猴D型逆轉(zhuǎn)錄病毒RT-PCR試劑盒返回列表頁

參考價(jià): ￥ 1990 ￥ 1790

訂貨量: 1-4 件 ≥5 件

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號50次

品牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所在地上海

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更新時(shí)間：2020-08-12 16:25:03瀏覽次數(shù)：429次

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供貨周期	一周	規(guī)格	50T
貨號	XY-0671	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性。

供貨周期

一周

規(guī)格

50T

貨號

XY-0671

應(yīng)用領(lǐng)域

醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)

主要用途

熒光定量PCR具有更高的擴(kuò)增效率、更高的擴(kuò)增靈敏度、更高的擴(kuò)增特異性。

猴D型逆轉(zhuǎn)錄病毒RT-PCR試劑盒

Simian Type-D Retrovirus(SRV)

產(chǎn)品及特點(diǎn)

猴 D 型逆轉(zhuǎn)錄病毒(Simian Type D Retrovirus, SRV)會(huì)引起猴獲得性免疫缺陷綜合征，也就是猴艾滋病，該病在非洲的爆發(fā)導(dǎo)致了黑猩猩種群數(shù)量的下降，患病的黑猩猩有類似晚期人艾滋病患者的器官及組織損壞的癥狀，受感染的黑猩猩有比未被感染的高 10 至 16 倍的死亡風(fēng)險(xiǎn)，被感染的雌性的生育力下降，還可能將病毒傳給它們的幼兒，這些幼兒死亡率也比未受感染的雌性幼兒更高。該病毒對人類研究艾滋病毒具有重要意義，為此本公司基于熒光定量 PCR 原理開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn)：

1. 一站式，用于不需要單獨(dú)準(zhǔn)備每種成分，包括引物和對照。

2.根據(jù)猴 D 型逆轉(zhuǎn)錄病毒的保守基因序列設(shè)計(jì)的引物，具有良好的特異性。

3. 靈敏度可以達(dá)到 1000 拷貝/反應(yīng)。

4. 使用一管式 RT-PCR 技術(shù)，RT 和 PCR 兩步在一個(gè)試管內(nèi)完成，不需要中間轉(zhuǎn)移樣品，降低了操作誤差和可能的污染。

5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研，不能用于臨床。

猴D型逆轉(zhuǎn)錄病毒RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號	成份	規(guī)格
試劑一	5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer	200 μL（橘黃蓋）
試劑二	MMLV-Taq Mix	75 μL（紅蓋）
試劑三	超純水	1 mL（亮黃蓋）
試劑四	猴 D 型逆轉(zhuǎn)錄病毒RT-PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑五	猴 D 型逆轉(zhuǎn)錄病毒RT-PCR 陽性對照（1×10E8 拷貝/μL）	50 μL（黃蓋）
試劑六	天凈沙核酸釋放劑（試用裝）	20 次（1mL，綠蓋）
試劑七	使用手冊	1 份）

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為 12 個(gè)月。收到貨后陽性對照需要跟其他成分分開放置，因?yàn)槠淙菀孜廴酒渌煞?，造成假陽性?nbsp;

自備試劑 樣品 RNA

使用方法 一、樣品 RNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽性對照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 流行性出血熱病毒 PCR 陽性對照的 100 倍稀釋作為制備的陽性對照；用水作為制備的陰性對照。制備所得成為樣品 RNA。

2. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 RNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 RNA 提取試劑盒兼容。

二、設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系）

3. 如果有 N+2 個(gè)樣品，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管（額外增加的兩個(gè)管一個(gè)是 RT-PCR 陽性對照，另一個(gè)是 RT-PCR 陰性對照）并按照下表在 PCR 管中加入下列成分：

成分	樣品	陽性對照	陰性對照
5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer	各 4 μL	4 μL	4 μL
猴 D 型逆轉(zhuǎn)錄病毒RT-PCR 引物混合液	各2μL	2μL	2μL
N+2 個(gè)制備的 RNA 樣品	各12.5 μL
超純水		12.5 μL
猴 D 型逆轉(zhuǎn)錄病毒RT-PCR 陽性對照的 100 倍稀釋液	L		12.5 μL
MMLV-Taq Mix	1.5 μL	1.5 μL	1.5 μL

4. 上機(jī)進(jìn)行 RT-PCR，RT-PCR 反應(yīng)參數(shù)為:

過程	溫度	時(shí)間
逆轉(zhuǎn)錄	42℃	60 分鐘
預(yù)變性	94℃	3 分鐘
PCR 反應(yīng) （35 個(gè)循環(huán)）	94℃	30 秒
	56℃	30 秒
	72℃	40 秒
延伸	72℃	7 min

5. 瓊脂糖電泳檢測擴(kuò)增效果。如果陰性對照有擴(kuò)增產(chǎn)物或陽性對照無擴(kuò)增產(chǎn)物，則說明實(shí)驗(yàn)失敗，需要分析實(shí)驗(yàn)失敗的原因。只有在陰性對照沒有擴(kuò)增產(chǎn)物、陽性對照有 122bp 預(yù)期的擴(kuò)增產(chǎn)物的情況下，才有必要分析樣品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，如果有擴(kuò)增產(chǎn)物則為陽性，如果無則為陰性。