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當前位置：上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次豬痢疾密螺旋體PCR試劑盒
| 供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | XY-0715 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),農業(yè) |
| 主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。 |
豬痢疾密螺旋體PCR試劑盒
Treponema hyodysenteriae
產品及特點
豬痢疾密螺旋體（Treponema hyodysenteriae）為豬的一種傳染性粘膜 出血性結腸炎。臨床特征為消瘦，排瀉糞便中含有粘液、血液和壞死物，不經 治療的病豬可能死亡。因此快速靈敏檢測豬痢疾密螺旋體具有重要意義。本產 品就是為此目的根據 PCR 原理開發(fā)的試劑盒，它具有下列特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供寄生蟲 DNA 模板。
2. 引物經過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增豬痢疾密螺旋體，與其他微生物沒 有交叉反應。
3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。
6. 本產品只能用于科研。
豬痢疾密螺旋體PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號 | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | PCR MagicMix 3. | 1 mL（紅蓋） |
試劑二 | 超純水 | 1 mL（亮黃蓋） |
試劑三 | 豬痢疾密螺旋體 PCR 引物混合 液 | 100 μL（白蓋） |
試劑四 | 豬痢疾密螺旋體 PCR 陽性對照 （1×10E8 拷貝/μL） | 50 μL（黃蓋））
|
| 試劑五 | 天凈沙核酸釋放劑試用裝 | 20 次（1mL，綠蓋） |
試劑六 | 使用手冊 | 1 份 |
運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 如果有 N 個樣品，必須設置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。
2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。
二、設置 PCR 反應（40μL 體系）
3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分：
成分 | N+2個 樣品管 | PCR陰性對照 | PCR陽性對照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
豬痢疾密螺旋體PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 個樣品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 陰性對照（水） |
| 18 μL | - |
PCR 陽性對照（豬痢疾密 螺旋體 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液） | - |
| 18 μL |
4. 按下表設置 PCR 反應：
過程 | 溫度 | 時間 |
預變性 | 95℃ | 5 min |
PCR反應 （35個循環(huán)） | 95℃ | 15 sec |
57℃ | 15 sec | |
72℃ | 40 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、電泳檢測
5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物 陽性對照必須有預期條帶出現，陰性對照必須無任何擴增，否則實驗無效。 對沒有擴增產物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑 制劑的感染。
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