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偶氮聚合物引發(fā)劑

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更新時(shí)間:2020-09-17 09:45:18瀏覽次數(shù):2190

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產(chǎn)品簡介

應(yīng)用領(lǐng)域 化工    
偶氮聚合物引發(fā)劑
一個(gè)世紀(jì)以來,生物學(xué)家們一直夢想著能夠透過器官甚至整個(gè)機(jī)體,親眼看到細(xì)胞連接和精細(xì)結(jié)構(gòu),現(xiàn)在隨著組織透明化技術(shù)的完善,這一夢想終于成為了現(xiàn)實(shí)。

詳細(xì)介紹

0914812534287272.jpg偶氮聚合物引發(fā)劑

 

一個(gè)世紀(jì)以來,生物學(xué)家們一直夢想著能夠透過器官甚至整個(gè)機(jī)體,親眼看到細(xì)胞連接和精細(xì)結(jié)構(gòu),現(xiàn)在隨著組織透明化技術(shù)的完善,這一夢想終于成為了現(xiàn)實(shí)。

 

◆原理

VA-044 作為組織透明化技術(shù)中起關(guān)鍵作用的水溶性偶氮引發(fā)劑,普遍適用于高分子合成的水溶液聚合與乳液聚合。在CLARITY 方法中,VA-044 作為引發(fā)劑,催化丙烯酰胺、甲叉雙丙烯酰胺和PFA 形成水凝膠。

2013 年3 月,斯坦福大學(xué)的Karl Deisseroth 博士的團(tuán)隊(duì)在自然雜志上發(fā)表了Structural and molecularinterrogation of intact biological systems 的論文,文中介紹了制備組織的方法CLARITY。該方法是將組織浸透在水凝膠單體溶液中中,經(jīng)電泳使組織呈現(xiàn)透明。這種水溶膠—組織雜交的方式可以維持組織的原有結(jié)構(gòu),使生物分子結(jié)合到水凝膠的網(wǎng)孔上。重要的是脂類不會(huì)結(jié)合到水凝膠上,因而可以通過這種方式將脂類有效去除。通過這種方法制備的組織樣品可用于后期的影像實(shí)驗(yàn),免疫染色,原位雜交等實(shí)驗(yàn)。

CLARITY可用于熒光蛋白質(zhì)和抗體的免疫染色,可作為解析腦神經(jīng)回路的有效工具。VA-044是論文實(shí)驗(yàn)步驟中透明化工程的使用試劑。

 

◆特點(diǎn)• 優(yōu)勢

操作簡單,固定蛋白后只需進(jìn)行電泳;

可保持組織、器官和全身結(jié)構(gòu)的完整性;

可進(jìn)行原位雜交和免疫組化實(shí)驗(yàn),可進(jìn)行多輪染色和脫色步驟;

 

◆案例•應(yīng)用

 

Clarity 介紹

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PARS 介紹

2014 年7 月,加州理工學(xué)院的研究團(tuán)隊(duì)在細(xì)胞雜志上發(fā)表論文Single-Cell Phenotyping within TransparentIntact Tissue through Whole-Body Clearing,將CLARITY 技術(shù)推進(jìn)到一個(gè)新的高度——全身組織透明化技術(shù),稱為PARS。這種技術(shù)將透明劑持續(xù)泵入動(dòng)物的循環(huán)系統(tǒng)從而進(jìn)入各個(gè)組織,或者通過腦脊液管道泵入大腦,再去除脂質(zhì),使器官和生物體被高分子滲透而呈現(xiàn)透明,并可用熒光抗體分析和揭示具有完整連接性的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和三維細(xì)胞排列。

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圖A. PARS 建立的小鼠透明化腸,并用凝集素

亞甲基藍(lán)、DAPI 進(jìn)行免疫標(biāo)記后成像 

并獲得三種免疫標(biāo)記的疊加圖

圖B. PARS 建立的小鼠透明化腎臟并用抗微管蛋白抗體

和DRAQ5 進(jìn)行免疫標(biāo)記后成像,并獲得兩種免疫

標(biāo)記的疊加圖   

 

CLARITY處理的小鼠腦

 

 

CLARITY處理的小鼠大腦成像

 

CLARITY處理的Thy1-YFP(H Line)小鼠大腦的熒光觀察
(A)從大腦皮質(zhì)到海馬的3-D觀察圖像
(B)大腦皮層Ⅴ層的錐體細(xì)胞的樹突圖像
拍攝條件:雙光子   使用設(shè)備:Olympus FV1000直立顯微鏡,25倍浸液物鏡

 

CLARITY+抗體處理的小鼠大腦成像

 

CLARITY處理后,用Iba1抗體染色Thy1-YFP(H線)小鼠大腦的熒光觀察
(A)在大腦皮質(zhì)的小膠質(zhì)細(xì)胞的3-D觀察圖像
(B)從表面層觀察皮質(zhì)Ⅰ層的圖像
拍攝條件:單光子   使用設(shè)備:Olympus FV1000直立顯微鏡,25倍浸液物鏡

 

2.jpg

 

產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱產(chǎn)品規(guī)格產(chǎn)品等級
 223-02112 VA-044 25 g 細(xì)胞生物學(xué)
 225-02111 VA-044 100 g 細(xì)胞生物學(xué)
 227-02115 VA-044 500 g 細(xì)胞生物學(xué)
 019-19741 小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞特異性蛋白抗體(免疫組化) 50μg 免疫化學(xué)用

 

偶氮聚合物引發(fā)劑

相關(guān)資料

宣傳單頁.jpgCLARITY電泳儀器.jpg CLARITY_Protocol.jpg

 

VA-044(聚合物引發(fā)劑)

 

 

 

CLARITY電泳儀器

 

 

 

CLARITY_Protocol

 

 

 

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CT%$T[~CX]6_9H[F4[6TNS7.png

 

 

文獻(xiàn)驗(yàn)證可與Wako透明化試劑配合使用的抗體列表

組織透明化試劑系列

 

 

◆相關(guān)產(chǎn)品

制造商

產(chǎn)品編號

中文名稱

包裝

NIHON EIDO

631-26271

脂質(zhì)去除用電泳槽

一臺

 

CLARITY 步驟

圖片4.jpg

 

水凝膠單體溶液組成

 

●VA-044············1 g
40%的丙烯酰胺······40 mL
2%雙丙烯酰胺·····10 mL
10×PBS···········40 mL
16%多聚甲醛·····100 mL

皂素···········200 mL

水··············210 mL

 

電泳緩沖液

硼酸...123.66 g
SDS····400 g
NaOH···調(diào)制至pH8.5

水·····定容至10 L

Electrophoresis Chamber For Lipid Extraction

 

循環(huán)泵

GPU-1,GPU-2(AS版)

 

CLARITY試劑列表

產(chǎn)品編號

中文名稱

規(guī)格

包裝

017-08012

丙烯酰胺

電泳用

25 g

019-08011

100 g

011-08015

500 g

138-06032

N,N'-亞甲基雙(丙烯酰胺)

電泳用

25 g

130-06031

100 g

163-25265

磷酸緩沖液

細(xì)胞培養(yǎng)用

500 mL

160-16061

多聚甲醛

組織固定用

100 g

162-16065

500 g

163-25983

16w/v% 低聚甲醛溶液

電子顯微鏡用

10 mL×10A

198-08853

皂素

和光一級

1 g

192-08851

5 g

029-02191

硼酸

試劑特級

100 g

021-02195

500 g

023-02194

4 kg

190-13982

十二烷基硫酸鈉

分子生物學(xué)用

25 g

192-13981

100 g

194-13985

500 g

 

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