詳細(xì)介紹
LBIS® 抗dsDNA-小鼠ELISA試劑盒
近年來研究人員多通過使用與人具有同樣的自身免疫性疾病的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自然發(fā)病和人為使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)癥的方式來研究自身免疫性疾病的機(jī)制闡明和新型藥物開發(fā)。自然發(fā)病系統(tǒng)代表的MRL/lpr小鼠被應(yīng)用到很多實(shí)驗(yàn)。MRL/lpr小鼠在淋巴結(jié)腫瘤發(fā)病同時(shí)伴隨著腎炎、血管炎、關(guān)節(jié)炎的高機(jī)率發(fā)病,對(duì)包含慢性風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)模型的自身免疫性疾病發(fā)病機(jī)制的闡明,可作為有效的模型進(jìn)行研究。MRL/lpr小鼠血清中被檢測(cè)出自身抗體有IgG型類風(fēng)濕因子(RF)、IgM型類風(fēng)濕因子(RF)、抗ssDNA 抗體、抗dsDNA 抗體、抗Sm 抗體。
通過使用該疾病動(dòng)物血清中自身抗體含量做標(biāo)準(zhǔn)曲線,通過單位轉(zhuǎn)換,可進(jìn)行測(cè)量之間數(shù)值的比較。
LBIS® 抗dsDNA-小鼠ELISA試劑盒采用了測(cè)定小鼠抗dsDNA 抗體濃度的夾心酶聯(lián)免疫測(cè)定法。
此試劑盒僅限研究使用。
◆特點(diǎn)
●全反應(yīng)時(shí)間是4小時(shí)20分鐘。
●測(cè)定小鼠血清或者血漿(肝素血漿除外)中的抗dsDNA 抗體濃度。
●可測(cè)定微量樣本(標(biāo)準(zhǔn)操作法是5 μL)。
●1個(gè)試劑盒可做96孔。
●標(biāo)準(zhǔn)品是小鼠源。
●全部試劑均為液體。
試劑盒的保存和使用期限
試劑盒在2-8℃保存。此保存條件下,有效期(記載在外箱標(biāo)簽)內(nèi)試劑盒是穩(wěn)定的。開封的試劑對(duì)應(yīng)保存狀態(tài)可能會(huì)受到影響,請(qǐng)盡早使用。
◆測(cè)定原理
本試劑盒是標(biāo)準(zhǔn)品、稀釋樣本在抗原包被的微孔板中進(jìn)行孵育處理。孵育2小時(shí)后清洗,加入過氧化物酶結(jié)合抗小鼠IgG抗體,與捕捉的抗體孵育2小時(shí)。清洗后,顯色劑(TMB)與孔中殘留的過氧化物酶反應(yīng)。添加酸性溶液可終止反應(yīng)。反應(yīng)生成的黃色產(chǎn)物在450 nm處(副波長620 nm)測(cè)定。吸光度與抗小鼠dsDNA 抗體濃度成正比。標(biāo)準(zhǔn)品濃度對(duì)應(yīng)吸光度可制作成標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得未知樣本濃度。
◆試劑盒組成
組成 | 狀態(tài) | 包裝 |
(A)抗原包被96孔板 | 直接使用 | 96 wells((8×12)/個(gè)) |
(B)標(biāo)準(zhǔn)抗小鼠dsDNA 抗體溶液(10000 mU/mL)※ | 濃縮液 | 100 μL/瓶 |
(C)緩沖液 | 直接使用 | 60 mL/瓶 |
(D)標(biāo)記抗體 (過氧化物酶結(jié)合抗小鼠IgG抗體) | 濃縮液 | 20 μL/瓶 |
(E)顯色液(TMB) | 直接使用 | 12 mL/瓶 |
(F)終止液(1M H2SO4)※注意操作 | 直接使用 | 12 mL/瓶 |
(G)濃縮清洗液(10×) | 濃縮液 | 100 mL/瓶 |
蓋板 | 1 個(gè) | |
操作說明書 | 1 本 |
※根據(jù)批次不同,數(shù)值有差異。
◆所需必要設(shè)備
●蒸餾水。
●標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋用試管。
●清洗液(稀釋用溶液)用玻璃器具。(量筒·瓶)
●槍頭交換式移液器。(一次性槍頭5 μL正規(guī)的移液槍,以及50-450 μL正規(guī)的移液槍)
●連續(xù)分裝移液槍。(例:Eppendorf 的multipette plus、可進(jìn)行100 μL連續(xù)分裝的儀器。)
●紙巾等吸水性物品。(清洗后去除板上殘留液體)
●攪拌器。(Vortex類型)
●96孔板用振蕩器。(約800 rpm)
●96孔板用清洗機(jī)(若有更好)或者注射瓶。
●96孔板酶標(biāo)儀。(450 ±10 nm 、620 nm:600~650 nm)
●數(shù)據(jù)分析用軟件。(若有是更好)
◆試劑盒性能
●測(cè)定范圍
●小鼠抗dsDNA 抗體檢測(cè)范圍在15.6-1000 mU/mL內(nèi)。
●特異性
●本ELISA系統(tǒng)使用的標(biāo)識(shí)抗體對(duì)抗小鼠IgG抗體具有特異性。
●與小鼠IgM的反應(yīng)交差性在檢測(cè)靈敏度以下。
●精密度實(shí)驗(yàn)
●①批次變動(dòng)(N=30)平均C.V.值是4.2%
●②日差可重復(fù)性實(shí)驗(yàn)(N=30、3天)平均C.V.值是4.7%
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 |
631-02699 | Lbis®小鼠抗雙鏈DNA ELISA試劑盒 | 96 tests |
LBIS® 抗dsDNA-小鼠ELISA試劑盒